??????Fura-2 AM,也稱Fura-2 pentakis(acetoxymethyl) ester,是最常用的檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針之一。分子式為 C44H47N3O24,分子量為1001.9。 ??????本Fura-2 AM(鈣離子熒光探針)是配制于無水DMSO(anhydrous DMSO)中的儲存液,濃度為2mM。 ??????Fura-2 AM是一種可以穿透細胞膜的熒光染料。Fura-2 AM的熒光比較弱,激發(fā)波長為369nm,發(fā)射波長為 478nm,并且其熒光不會隨鈣離子濃度改變而改變。Fura-2?AM進入細胞后可以被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fura-2,從而被滯留在細胞內(nèi)。Fura-2可以和鈣離子結合,結合鈣離子后在330-350nm激發(fā)光下可以產(chǎn)生較強的熒光,而在380nm激發(fā)光下則會導致熒光減弱。這樣就可以使用340nm和380nm這兩個熒光的比值來檢測細胞內(nèi)的鈣離子濃度,可以消除不同細胞樣品間熒光探針裝載效率的差異,熒光探針的滲漏,細胞厚度差異等一些誤差因素。Fura-2和鈣離子結合后,激發(fā)波長為335nm(激發(fā)波長隨離子濃度的的不同而有所不同),發(fā)射波長為505nm。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為340nm,發(fā)射波長為510nm。如果做雙波長檢測,則推薦使用的激發(fā)波長為340nm和380nm。Fura-2的激發(fā)光譜參考下圖,不同曲線表示不同鈣離子濃度時的激發(fā)光譜。
??????用于細胞內(nèi)鈣離子檢測時,F(xiàn)ura-2 AM的常用濃度為0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fura-2 AM的適當溶液和細胞一起在4-37℃孵育15-60分鐘,即可完成熒光探針的裝載。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃避光保存,6個月有效。 注意事項: ??????本Fura-2?AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。 ??????熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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