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??????WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation. ??????H, human; M, mouse; R, rat. ??????本Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗體(Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)antibody)為進(jìn)口分裝,用人工合成的含磷酸化Thr28的一段人FoxO4多肽進(jìn)行適當(dāng)修飾后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽親和柱經(jīng)過兩步純化得到的高純度抗體。 ??????本Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗體可以檢測內(nèi)源性的Thr24被磷酸化的FoxO1或Thr32位磷酸化的FoxO3a,也可檢測內(nèi)源性的Thr28被磷酸化的FoxO4。不識(shí)別其它位點(diǎn)磷酸化的FoxO1。 ??????轉(zhuǎn)錄因子Forkhead家族蛋白與橫紋肌肉瘤、急性白血病等腫瘤發(fā)生有關(guān)。該轉(zhuǎn)錄因子蛋白家族中的FoxO1,FoxO4和 FoxO3a,和線蟲同源蛋白DAF-16的序列高度相似,介導(dǎo)了包括IGFR1,PI3K和Akt在內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。Forkhead家族蛋白激活后,可通過促進(jìn)細(xì)胞周期阻滯(cell?cycle?arrest)和細(xì)胞凋亡而抑制腫瘤。高表達(dá)Forkhead家族蛋白會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞周期抑制蛋白p27Kip1的激活。同時(shí)Forkhead家族蛋白在TGF-β介導(dǎo)的p21CIP1上調(diào)中起作用,而該過程又可被PI3K所負(fù)調(diào)控。胰島素等誘導(dǎo)的增殖信號(hào)會(huì)導(dǎo)致FoxO蛋白通過Akt介導(dǎo)的Thr24、Ser256和Ser319位點(diǎn)的磷酸化,導(dǎo)致FoxO從細(xì)胞核中轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞漿中,從而抑制其轉(zhuǎn)錄活性。FoxO還可以被Sirt1、p300等進(jìn)行乙?;{(diào)控。 ??????FoxO1,也稱FoxO1a、FKH1或FKHR,屬于Forkhead蛋白家族中的O亞家族(O?subclass),對(duì)于機(jī)體正常生長發(fā)育是必需的。研究表明,F(xiàn)oxO1參與多種多樣的細(xì)胞功能,包括長壽、代謝、繁殖、胰島素調(diào)節(jié)、細(xì)胞周期、凋亡和應(yīng)激反應(yīng)等。FoxO1參與通過PI3K信號(hào)通路的生長信號(hào)應(yīng)答。FoxO1三個(gè)保守的serine/threonine位點(diǎn)被Akt磷酸化后,可導(dǎo)致其從細(xì)胞核向細(xì)胞漿轉(zhuǎn)運(yùn)和基因轉(zhuǎn)錄活性的抑制。 ??????配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測時(shí)的一抗稀釋。 ??????建議抗體使用時(shí)的稀釋比例如下(實(shí)際使用時(shí)需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整):
??????本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測,至少可以檢測20次。 包裝清單:
保存條件: ??????Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。 注意事項(xiàng): ??????對(duì)于本抗體,Western檢測時(shí)一抗要4℃緩慢搖動(dòng)過夜,如果僅短時(shí)間與一抗孵育檢測效果較差。 ??????在Western實(shí)驗(yàn)后,請(qǐng)注意回收稀釋的抗體。回收的抗體在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時(shí)至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體,4℃保存。 ??????回收后重復(fù)使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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