Xeno-Free人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基
產(chǎn)品基本信息
Applied CellTMXeno-Free人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基
基礎(chǔ)培養(yǎng)基450mL，添加劑50mL
基礎(chǔ)培養(yǎng)基2-8℃，添加劑-20℃至-80℃；混合后2-8℃
人類骨髓、脂肪、臍帶等組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞
原代分離、擴(kuò)增與傳代培養(yǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Xeno-Free人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基是埃澤思生物（Applied CellTM）自主研發(fā)的一款無(wú)外源動(dòng)物成分的人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基。可應(yīng)用于人骨髓、脂肪、臍帶等組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞的原代分離、擴(kuò)增與傳代培養(yǎng)，并保持其多向分化潛能。本產(chǎn)品內(nèi)毒素水平遠(yuǎn)低于中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)，生產(chǎn)過(guò)程遵循ISO9001體系,并符合GMP指導(dǎo)原則。
Xeno-Free人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基主要成分：氨基酸，維生素、無(wú)機(jī)鹽、白蛋白，轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、微量元素，細(xì)胞因子等。
產(chǎn)品特性
無(wú)外源動(dòng)物蛋白成分，大大降低各類病毒、霉菌和支原體等的污染風(fēng)險(xiǎn)。
全程無(wú)血清生產(chǎn)，極大降低批次間差異。
可用于原代分離，且培養(yǎng)過(guò)程無(wú)需包被培養(yǎng)板。
擴(kuò)增效率高，24h左右增殖翻倍，節(jié)省培養(yǎng)時(shí)間。
內(nèi)毒素<0.06EU/ml，遠(yuǎn)低于中國(guó)藥典水平
Human Mesenchymal Stem Cell Basal Medium
人間充質(zhì)干細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基
Human Mesenchymal Stem Cell Supplement
人間充質(zhì)干細(xì)胞添加劑
產(chǎn)品內(nèi)容
相關(guān)產(chǎn)品
Serum-Free細(xì)胞凍存液（Applied CellTM: Cat. no.AC-1001005/1001006）
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（Applied CellTM: Cat. no.AC-2001003）
人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（Applied CellTM: Cat. no.AC-2001004）
Xeno-Free細(xì)胞消化液（Applied CellTM: Cat. no. AC-1001024/1001025 ）
人間充質(zhì)干細(xì)胞包被液（Applied CellTM: Cat. no. AC-1001003C）
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基配制
1.2將添加劑以10%比例加入到人間充質(zhì)干細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，混勻，即為人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基（AC-1001003）?；旌虾笈囵B(yǎng)基可在2-8℃ 穩(wěn)定儲(chǔ)存2-3周，不建議使用已配制超過(guò)3周的培養(yǎng)基。
1.3人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基可直接應(yīng)用于人類骨髓、脂肪、臍帶等組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞的原代分離、擴(kuò)增與傳代培養(yǎng)。
1.4 貼壁法分離臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞時(shí)，選擇性使用人間充質(zhì)干細(xì)胞包被液（AC-1001003C）預(yù)先包被培養(yǎng)板，可提高原代分離效率。此步驟非必需，為可選擇步驟，不包被也可以完成原代分離。
操作方法(以下步驟皆應(yīng)在無(wú)菌條件下操作)
hMSC細(xì)胞復(fù)蘇(10cm dish)
2.1 從液氮中取出凍存的hMSC細(xì)胞，迅速將凍存管放入37℃水浴快速融解。
2.2 在生物安全柜或超凈臺(tái)中，將解凍后的細(xì)胞懸液緩慢加入5 mL預(yù)溫的人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基（AC-1001003）。
2.3 1000rpm 離心3 min，吸掉上清，加入10ml人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
2.4 將細(xì)胞均勻鋪到培養(yǎng)皿中，水平十字振動(dòng)培養(yǎng)皿使細(xì)胞均勻分布，5% CO2的37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)后觀察細(xì)胞狀態(tài)。
2.5 24h后更換新鮮人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，每2-3天更換培養(yǎng)液。
hMSC細(xì)胞傳代培養(yǎng)
1. 在顯微鏡下觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到90%，即可傳代。
2. 在超凈臺(tái)/安全柜中，吸掉原有培養(yǎng)基，加入PBS溶液清洗一次，加入Xeno-Free細(xì)胞消化液（AC-1001024/1001025）使之完全覆蓋皿/瓶底。
3. 室溫孵育4-5分鐘或37℃孵育2-4分鐘，顯微鏡下觀察大部分細(xì)胞脫離皿底即停止消化。
4. 加入消化液2倍體積的人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，用移液器輕輕吹打瓶壁上未完全脫離的細(xì)胞，并輕輕吹打混勻，使細(xì)胞完全分散。
5. 將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到15 mL離心管中，1000 rpm離心3 min。
6. 棄上清，加入人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，重懸細(xì)胞，計(jì)數(shù)。1：3-1：4比例傳代，或按1-2x104 cells/cm2 傳代，均勻鋪在培養(yǎng)皿/瓶中，置于37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注意：細(xì)胞傳代所需的時(shí)間：2-4天。5代及之前的細(xì)胞，生長(zhǎng)速度較快。5代以后的細(xì)胞，生長(zhǎng)速度稍緩。
hMSC細(xì)胞凍存
1. 細(xì)胞達(dá)到90%匯合度， 吸掉原有培養(yǎng)基，PBS清洗一次。
2. 加入Xeno-Free細(xì)胞消化液（AC-1001024/1001025）使之完全覆蓋皿/瓶底，室溫孵育4-5min或37℃孵育2-4min分鐘，顯微鏡下觀察大部分細(xì)胞脫離皿底即停止消化。
3. 加入消化液2倍體積的人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基，用移液槍輕輕吹打瓶壁上未完全脫離的細(xì)胞，并輕輕吹打混勻，使細(xì)胞完全分散。
4. 將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到15 mL離心管中，1000 rpm離心3 min，吸掉上清。
5. 加入適量Serum-Free細(xì)胞凍存液（AC-1001005/1001006），調(diào)整細(xì)胞凍存密度在1×106 cells/mL左右，每支凍存管分裝1.5-2ml。
6. 直接放入-80℃，24h后轉(zhuǎn)入液氮中長(zhǎng)期保存。
質(zhì)量控制
0.1μm過(guò)濾，無(wú)菌檢測(cè)合格
0.1μm過(guò)濾，支原體檢測(cè)為陰性，
細(xì)胞為梭形，呈指紋狀或旋渦狀生長(zhǎng)
關(guān)鍵字： 間充質(zhì)干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基;
上海埃澤思生物科技有限公司（ Applied Cell?）專注于治療用及生產(chǎn)用細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品研發(fā)與生產(chǎn)，目前公司產(chǎn)品已經(jīng)涵蓋干細(xì)胞、免疫細(xì)胞培養(yǎng)，凍存以及分離等領(lǐng)域。為保證產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化、一致性，我們對(duì)所有產(chǎn)品進(jìn)行嚴(yán)格的原料篩選及生產(chǎn)控制。目前，我公司已通過(guò)ISO9001：2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證。除提供產(chǎn)品支持，本公司的技術(shù)團(tuán)隊(duì)還可為您提供及時(shí)有效的技術(shù)支持、技術(shù)咨詢，以及與您探討感興趣的科學(xué)問(wèn)題和解決方案。最終我們希望通過(guò)高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)，不斷推動(dòng)細(xì)胞治療、再生醫(yī)學(xué)以及藥物發(fā)展與創(chuàng)新，愿我們?cè)缛粘蔀槟谘邪l(fā)科研及應(yīng)用領(lǐng)域的忠誠(chéng)合作伙伴。
公司愿景:
我們努力成為中國(guó)細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域最頂尖產(chǎn)品與服務(wù)提供商。
公司使命: