化學(xué)名

2-(4,6-dimethylpyrimidin-2-yl)sulfanyl-N-[5-(naphthalen-1-ylmethyl)-1,3-thiazol-2-yl]acetamide

簡稱

SirReal2

別名

SirReal 2; 3TE; BAS 09687905; AC1LM3MJ; ZINC818861; STL019057; ZINC00818861; ST50111553

中文名

－

化學(xué)式

C₂₂H₂₀N₄OS₂

分子量

420.55

CAS號

709002-46-0

純度

98.7%

溶劑/溶解度

Water <1mg/ml; DMSO 84mg/ml warmed; Ethanol <1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.19ml DMSO，或者每4.21mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC0290-10mM用DMSO配制。

產(chǎn)品描述

SirReal2是一種有效的選擇性Sirt2抑制劑，IC50為140nM。

信號通路

Epigenetics; DNA Damage

靶點(diǎn)

SIRT2

－

－

－

－

IC50

140nM

－

－

－

－

體外研究

在HeLa細(xì)胞中，SirReal2通過Sirt2-特異性氨基酸網(wǎng)絡(luò)選擇性抑制Sirt2，并誘導(dǎo)微管蛋白高度乙酰化和BubR1的顯著消耗。

體內(nèi)研究

在體內(nèi)，SirReal2抑制Sirt2活性，而不影響其他I類抗衰老酶Sirt1和Sirt3的活性。

臨床實(shí)驗(yàn)

N/A

特征

N/A

酶活性檢測實(shí)驗(yàn)

方法

初始篩選通過高通量熒光試驗(yàn)使用合成的基底ZMAL (Z-Lys(Acetyl)-AMC)進(jìn)行。人Sirt1133-747，人Sirt225-389，人Sirt3101-399或Sirt3118-395與試驗(yàn)緩沖液(50mM Tris/HCl，137mM NaCl，2.7mM KCl，1mM MgCl2 pH 8.0)，β-NAD+ (終試驗(yàn)濃度500μM)，底物ZMAL (12.6mM儲備液在DMSO中稀釋到終試驗(yàn)濃度10.5μM)，以及DMSO中不同濃度的各抑制劑混合，DMSO作為對照組(終DMSO濃度5-20%(v/v))。混合物在37℃下，以150r.p.m攪拌培育4小時。加入包含NCA和胰蛋白酶(50mM Tris/HCl，100mM NaCl，6.7%(v/v)DMSO，胰蛋白酶5.5U/μl，8mM NCA pH8.0，60μl)的溶液停止脫乙?；?，然后培育混合物使脫乙酰化產(chǎn)物胰蛋白酶化以釋放熒光(20min，37℃，150r.p.m.)。隨后熒光強(qiáng)度在酶標(biāo)儀(λex 390nM, λem 460nM)上測量?；旌衔镏幸种频牧颗cDMSO對照組進(jìn)行確定。IC50值通過Graphpad Prism軟件使用非線性回歸擬合劑量響應(yīng)曲線來確定。SirReal1和SirReal2與非標(biāo)記的乙酰-賴氨酸多肽底物(基于α-微管蛋白與兩個另外的色氨酸(殘基36-44，H-PSDK(Acetyl)TIGGWW-NH2，10μM)) 進(jìn)行Sirt1-3抑制測試。SirReal2與非標(biāo)記乙酰-賴氨酸多肽底物(Sirt5：Benzoyl-GVLK(Succinyl)EYGV-NH2，10μM；Sirt6：Ac-EALPKK(Myristoyl)TGG-NH2，10μM)進(jìn)行Sirt5-6抑制測試。底物進(jìn)行培育(10min，~0.5μM Sirt1/2/3/5/6，500μM β-NAD+，5-20%(v/v)DMSO，50mM Tris/HCl，137mM NaCl，2.7mM KCl，1mM MgCl2 pH8.0)，通過加入三氟乙酸(TFA，10%(v/v)，終濃度1%(v/v))停止。終止反應(yīng)混合物的成分通過HPLC(Agilent 1100，Phenomenex反相柱Kinetex RP18 2.7μM，50×3mm)使用線性梯度的乙腈(20-60%(v/v)乙腈，0.1%(v/v)TFA，0.6ml/min)進(jìn)行分離。乙酰化的和脫乙?；牡孜锿ㄟ^280nM下的吸光度定量。Sirt4-依賴性脫乙?；磻?yīng)與乙?；疦nt397-多肽(H-NITKLLK(Acetyl)AISPDK-NH2，250μM，GL BioChem，在50mM Tris/HCl中，150mM NaCl pH7.5)進(jìn)行。在0和45分鐘之間取樣，反應(yīng)通過以1:1與0.5%(v/v)TFA混合停止。隨后將樣品用0.1%(v/v)甲酸稀釋到5μM的多肽濃度，并自連接到LTQ質(zhì)譜儀的EASY-nLCII上分析。多肽在reprosil C18反相柱上通過線性梯度的乙腈(0-100%(v/v)，0.1%(v/v)TFA，300nl/min)分離。乙?；兔撘阴；嚯牡姆迕娣e使用Skyline55提取。DMSO溶液用作陰性對照，而生理抑制劑NCA溶液作為陽性對照。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞系

N/A

濃度

N/A

處理時間

N/A

方法

N/A

動物實(shí)驗(yàn)

動物模型

N/A

配制

N/A

劑量

N/A

給藥方式

N/A

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

SC0290-10mM

SirReal2 (SIRT2抑制劑)

10mM×0.2ml

SC0290-5mg

SirReal2 (SIRT2抑制劑)

5mg

SC0290-25mg

SirReal2 (SIRT2抑制劑)

25mg

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說明書

1份