培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：樹突狀細胞完全培養(yǎng)基
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%
溫度：37℃
細胞描述
名稱：C57小鼠外周血樹突狀細胞
狀態(tài)：成熟或者未成熟均可以提供
數(shù)目：大于106 /管
活力：＞90%
凍存：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO
運輸：干冰運輸（1管）或者活細胞一瓶
用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療
細胞傳代方法
顯微鏡下觀察細胞，當覆蓋80%底面積時，進行細胞傳代。注意不要等到細胞覆蓋100%的時候才傳代，那樣細胞容易老化。
在生物安全柜或者超凈臺中，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中
用PBS或者生理鹽水洗一遍
加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘
然后取出細胞，加入5ml培養(yǎng)基，吹打均勻后，轉(zhuǎn)移到15ml離心管中，1000rpm 離心5分鐘
離心后，去掉上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，按照1:3-1:5的比例進行細胞傳代培養(yǎng)。
注：C57小鼠外周血樹突狀細胞不宜進行多次傳代培養(yǎng)，使用新鮮的p0代細胞進行實驗。
細胞凍存方法
本品使用DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO 凍存液冷凍。
細胞復蘇方法
取出凍存管后，投入37℃水浴中，震蕩解凍2 min，
酒精消毒管壁外側(cè)后，將其轉(zhuǎn)入超凈臺中，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至離心管中，加入5 ml 37℃預熱的DMEM/F12+10%FBS培養(yǎng)基
將離心管離心（1000rpm，5 min）
棄去上清，再加入5ml 樹突狀細胞完全培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
關(guān)鍵字： 小鼠外周血樹突狀細胞
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