產(chǎn)品規(guī)格 （CAT#: LM1080）
K599 Electro： 50μl/支
pCAMBIA2301（control vector，10ng/μl )： 10μl
保存條件(保質(zhì)期)： -80℃（12個(gè)月）
K599 Electro感受態(tài)細(xì)胞基因型
Agrobacterium rhizogenes (strR ) pRi2659 (agropine type)
K599 Electro感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品說(shuō)明
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌，它能夠感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個(gè)別裸子植物。K599發(fā)根農(nóng)桿菌（NCPPB2659）含有pRi2659農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒，具有廣泛的宿主范圍（葫蘆科，豆科，茄科等），同時(shí)具有鏈霉素抗性。唯地生物開(kāi)發(fā)的K599電轉(zhuǎn)感受態(tài)特別適用于大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化，感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pCAMBIA2301質(zhì)粒（卡那霉素抗性）檢測(cè)，轉(zhuǎn)化效率>105 cfu/μg DNA；經(jīng)pCAMBIA2301-ZH質(zhì)粒（size:40 kd）檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)5×103 cfu/μg DNA。
K599 Electro感受態(tài)細(xì)胞常規(guī)操作方法
1. 0.1 cm電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘，待其瀝干水分，正置5分鐘，使乙醇充分揮發(fā)，待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中，壓實(shí)冰面，電極杯頂離冰面0.5 cm以方便蓋上杯蓋，冰中靜置5分鐘充分降溫。
2. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中5分鐘，待其融化，加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA（體積不大于6ul，用試劑盒抽提，雙蒸水溶解；轉(zhuǎn)化效率較高，次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量），用手撥打管底混勻，立即插入冰中，用200 μl槍頭將感受態(tài)-質(zhì)?；旌衔锟焖僖频诫姄舯?，蓋上杯蓋，空管保留待用。
3. 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀，設(shè)置參數(shù)：C=25 μF，PC=200 ohm，V=2400 V（此參數(shù)為Biorad 推薦，使用者也可按所用電轉(zhuǎn)儀推薦的protocol操作），將電擊杯從冰中拿出，吸水紙吸干外表面水份，快速放入電轉(zhuǎn)槽中，啟動(dòng)電擊，電擊完成快速插入冰中，加入1 ml無(wú)抗生素的TY，并轉(zhuǎn)移到感受態(tài)空管中，28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的TY平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
關(guān)鍵字： K599_感受態(tài)細(xì)胞_基因_
上海聯(lián)邁生物工程有限公司（LMAI Bio)是一家經(jīng)營(yíng)生物、儀器、試劑、耗材等科研產(chǎn)品的高新技術(shù)生命科學(xué)公司，在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過(guò)不懈的努力， 已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的一家供應(yīng)商，代理許多國(guó)際先進(jìn)水平的高科技產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診 斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。 公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó)，在同行獲得一致好評(píng)。 特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價(jià)格實(shí)惠，美國(guó)原裝進(jìn)口原代細(xì)胞，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基，細(xì)胞培養(yǎng)用的相關(guān)試劑，氨基酸，抗生素，維他命類產(chǎn)品品種齊全，試劑耗材種類繁多。 公司的規(guī)模和產(chǎn)品種類日益擴(kuò)大和更新，我們一直秉承著代理優(yōu)質(zhì)品牌的產(chǎn)品，服務(wù)好每一位顧客，將