本試劑盒采用在miRNA 3’末端加多聚A 尾Poly(A),再使用Anchored oligo(dT)通用逆轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),最終生成miRNA 對(duì)應(yīng)的cDNA 鏈。miRNA cDNA 鏈合成試劑盒包含miRNA 3’末端Poly(A)修飾過程和逆轉(zhuǎn)錄過程的所有試劑,該試劑盒具有高效的Poly(A)修飾和逆轉(zhuǎn)錄效率, 可從20pg-2μg 的total RNA 中有效制備miRNA對(duì)應(yīng)的cDNA 鏈。一次合成的cDNA可檢測(cè)多個(gè)microRNA,節(jié)約了樣品和成本。(該試劑盒可與miRNA熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒(ALH190)配套使用。) 試劑盒組分(25次): E.coli Poly(A) Polymerase(5U/μl)————————50U 10 × Poly(A) Polymerase Buffer—————————100μl 10 × rATP solution———————————————50μl 25μmol RT primer————————————————50μl RTase (200U/μl)-————————————————5000U 5×RT Reaction Mix-———————————————200μl RNase free H2O-—————————————————1ml 注意事項(xiàng): 用本試劑盒合成得到的cDNA模板用于下游PCR或者熒光定量PCR檢測(cè)時(shí),可以根據(jù)實(shí)際情況選擇使用量,如果發(fā)現(xiàn)有非特異擴(kuò)增條帶,或者融鏈曲線顯示有非特異擴(kuò)增,往往提示cDNA模板過量, 可以將上述cDNA模板稀釋幾十到幾百倍甚至上千倍再使用。 儲(chǔ)存條件:-20℃。 本制品別名:microRNA對(duì)應(yīng)的cDNA鏈合成試劑盒
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