飼料添加劑潮霉素 B 生產(chǎn)菌種和技術(shù)

    潮霉素B（Hygromycin B）是一種氨基糖苷類抗生素，由吸水鏈霉菌(Streptomyces hygroscopicus)發(fā)酵產(chǎn)生的抗生素。在低濃度情況下能驅(qū)除家畜雞和豬體內(nèi)的多種寄生蟲和促進(jìn)禽畜生長發(fā)育，并對(duì)革蘭氏陽性菌、陰性菌和真菌有抑制作用，且不被家畜吸收，在肉中幾無殘留量，是一種有效、安全、理想的廣譜驅(qū)蟲性抗生素。

【用途】(1)豬 潮霉素 B 長期飼喂能有效地控制豬蛔蟲、食道口線蟲和毛首線蟲感染，這是因?yàn)楸酒凡粌H對(duì)成蟲、幼蟲有效，而且還能抑制雌蟲產(chǎn)卵，從而使蟲體喪失繁殖能力。因此。妊娠母豬全價(jià)飼料中添加潮霉素 B，能保護(hù)仔豬在哺乳期間不受蛔蟲感染。潮霉素 B 推薦用于：產(chǎn)前 6 周和哺乳期母豬；不足 6 月齡仔豬(對(duì)蛔蟲最易感)。(2)禽 潮霉素 B 對(duì)雞蛔蟲、雞異刺續(xù)蟲和禽封閉毛細(xì)線蟲均有良好的控制效應(yīng)。

【藥物相互作用】用藥期間。禁止應(yīng)用具有耳毒作用的藥物，如氨基苷類、紅霉素等抗菌藥。另外，本品多以預(yù)混劑劑型上市，用時(shí)應(yīng)以潮霉素 B 效價(jià)做計(jì)量單位。實(shí)驗(yàn)室做為化學(xué)試劑使用。

我們主要進(jìn)行了如下研究工作，達(dá)到了下列技術(shù)指標(biāo)：
1、通過對(duì)產(chǎn)生菌的自然分離、紫外誘變、快中子處理和化學(xué)誘變EMS處理，使發(fā)酵單位從150-200U/mL提高到1000-1500U/mL；又經(jīng)原生質(zhì)再生，孢子和原生質(zhì)紫外處理及結(jié)合發(fā)酵培養(yǎng)基配比的優(yōu)化，使搖瓶發(fā)酵單位在2500-300U/mL，經(jīng)菌種選育獲得了高于原始出發(fā)菌種15-20倍的高產(chǎn)菌株。
2、發(fā)酵工藝研究，通過對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基如碳、氨源、無機(jī)鹽等配比的研究，特別是用均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)化培養(yǎng)基和發(fā)酵條件如溫度、pH、通氣、種子質(zhì)量等的優(yōu)選使發(fā)酵單位大幅度提高，并確定了一套可行的發(fā)酵工藝路線。經(jīng)發(fā)酵罐放大試驗(yàn)，其中200L罐發(fā)酵單位4批平均為276U/mL，最高達(dá)3194U/mL，2噸罐中3批平均為2226U/mL。
3、提取工藝研究及預(yù)混劑制備研究，通過對(duì)離子交換樹脂的篩選交換條件的研究，如交換時(shí)間、pH值、濃度的選擇及洗滌、洗脫條件的選擇，確定了一條簡便且收率高的提取工藝路線，根據(jù)9批200L罐發(fā)酵流提取結(jié)果，提取收率達(dá)82-95（粗品），制成穩(wěn)定性能良好的含 2 或 4%潮霉素 B 的預(yù)混劑，并提出較為合理可行的三廢治理方案。
4、潮霉素B微生物效價(jià)測(cè)定研究。通過鑒定菌、培養(yǎng)基、緩沖液的選擇，確定了以標(biāo)準(zhǔn)曲線法用于蹭體效價(jià)測(cè)定；二劑量法用于原料液樣品及預(yù)混劑樣品測(cè)定的合適微生物效價(jià)測(cè)定法。
5、通過對(duì)8批潮霉素B原料及3批預(yù)混劑樣的研究，并參照1990年版"中華人民共和國獸藥典"及日本越霉素A制劑中的有關(guān)項(xiàng)目規(guī)定，擬定了潮霉素B暫定持量標(biāo)準(zhǔn)草案及起草說明，制備了供質(zhì)量分析檢測(cè)用的標(biāo)準(zhǔn)品。
6、毒理及藥效試驗(yàn)。潮霉素 B 無致微生物突變作用，1mg/kg 對(duì)大鼠、仔鼠無胚胎及致畸作用。在豬飼料中添加 5-20ppm 潮霉素 B 連續(xù)喂養(yǎng) 8 周，有良好的驅(qū)除豬蛔蟲作用，其中以 10-20ppm 效果，且能明顯提高豬的增重和飼料轉(zhuǎn)化率。