ONPG的作用主要體現(xiàn)在以下方面:
1.科研領(lǐng)域:
酶活性檢測:作為 β- 半乳糖苷酶的特異性底物,ONPG 可被 β- 半乳糖苷酶水解為半乳糖和黃色的鄰 - 硝基苯酚。通過比色法或分光光度法,在 410-420nm 波長處檢測黃色產(chǎn)物鄰 - 硝基苯酚的吸光度變化,能定量或定性分析 β- 半乳糖苷酶的活性,常用于研究酶的動力學、酶的表達與調(diào)控等。
基因表達研究:在基因工程和分子生物學研究中,常利用 ONPG 來檢測與 β- 半乳糖苷酶相關(guān)基因的表達情況。如在研究大腸桿菌乳糖操縱子(lac operon)時,通過 ONPG 試驗可判斷 lacZ 基因是否正常表達 β- 半乳糖苷酶,進而研究基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯等調(diào)控機制。
微生物遺傳研究:ONPG 可用于篩選和鑒定具有特定基因或代謝能力的微生物菌株。如在誘變育種或基因工程改造微生物后,利用 ONPG 平板篩選出能夠產(chǎn)生 β- 半乳糖苷酶的陽性菌株,有助于研究微生物的遺傳變異和基因功能。
2.醫(yī)學診斷領(lǐng)域:
細菌鑒定與分類:在臨床微生物學檢驗中,ONPG 試驗是鑒別腸道桿菌的重要生化試驗之一。通過檢測細菌能否分解 ONPG 產(chǎn)生黃色產(chǎn)物,可區(qū)分乳糖發(fā)酵菌和非乳糖發(fā)酵菌,以及遲發(fā)酵乳糖的細菌,幫助快速準確地鑒定病原菌,為臨床診斷和治療提供依據(jù)。
疾病診斷輔助:某些疾病與 β- 半乳糖苷酶的活性異常有關(guān),如遺傳性半乳糖血癥等。檢測患者體內(nèi)相關(guān)組織或體液中 β- 半乳糖苷酶對 ONPG 的水解能力,有助于輔助診斷這些疾病,為疾病的早期診斷和治療提供參考。
3.工業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域:
酶制劑生產(chǎn)監(jiān)控:在 β- 半乳糖苷酶的工業(yè)化生產(chǎn)過程中,利用 ONPG 檢測酶活性,可實時監(jiān)控酶的發(fā)酵生產(chǎn)過程,優(yōu)化發(fā)酵條件,提高酶的產(chǎn)量和質(zhì)量,確保產(chǎn)品符合質(zhì)量標準。
乳制品質(zhì)量檢測:可用于檢測乳制品中 β- 半乳糖苷酶的殘留活性。在乳制品加工中,若 β- 半乳糖苷酶殘留量過高,可能會影響產(chǎn)品的質(zhì)量和口感,通過 ONPG 檢測可控制酶的添加量和反應程度,保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
關(guān)鍵字: ONPG;鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷;369-07-3;
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