葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)試劑盒說明書
分光光度法 50 管/24 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生 H2O2,是生 物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一
測定原理:
GOD 催化產(chǎn)生 H2O2,過氧化物酶催化 H2O2氧化 4-氨基安替比林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在 500 nm 有特征吸收峰,顏色深淺與 GOD 活性成線性關(guān)系。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
樣品測定的準備:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(10 4個): 提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細菌或 細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰 上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提 取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
伊勢久(江蘇連云港)生物科技有限責任公司
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