植酸(Saponin )含量試劑盒說明書
微量法 100 管/96 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
植酸又稱肌酸、環(huán)己六醇六全-二氫磷酸鹽,它主要存在于植物的種子、根干和莖中,其中以豆科植物 的種子、谷物的麩皮和胚芽中含量最高。植酸作為螯合劑、抗氧化劑、保鮮劑、水的軟化劑、發(fā)酵促進劑、 金屬防腐蝕劑等,廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、油漆涂料、日用化工、金屬加工、紡織工業(yè)、塑料工業(yè)及高分 子工業(yè)等行業(yè)領(lǐng)域。
測定原理:
磺基水楊酸-氯化鐵溶液顯紫紅色,在 500nm 下有最大吸光值。在 pH6.0-6.5 的環(huán)境下,植酸和鐵離子 結(jié)合使溶液顏色變淡,測定吸光度的降低來檢測植酸含量。
需自備儀器和用品:
酶標(biāo)儀、烘箱、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96 孔板、金屬震蕩儀、蒸餾水
植酸提取:
樣本烘干,粉碎過篩,稱取 0.05g,加入 1ml 試劑一,震蕩提取 2h;8000g,25℃離心 10min,取上清 0.5ml,加入 0.5ml 試劑二,混勻后 4℃靜置 2h,離心取上清待測。
測定步驟:
1、酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 500nm。
2、測定管:取 100μl 上清,加入 900μl 試劑三,混勻后取 300μl 加入 96 孔板,再加入 100μl 試劑四,充分 混勻后,室溫下靜置 5min,后離心取上清 200ul,測定 500nm 下吸光值 A1。
3、空白液配制:取 0.5ml 試劑一和 0.5ml 試劑二混勻。
4、空白管:取 100μl 空白液,加入 900μl 試劑三,混勻后取 300μl 加入 96 孔板,再加入 100μl 試劑四,充 分混勻后,室溫下靜置 5min,后離心取上清 200ul,測定 500nm 下吸光值 A2。計算ΔA=A2-A1。 空白管只要做一管。
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