從日本菊中分離和分析 1-O-乙酰溴內(nèi)酯并測(cè)定抗真菌活性

為明確日本花中的主要抗真菌化合物，對(duì)日本花粗提物進(jìn)行氯仿提取分離，得到化合物 1-O-乙酰不苯內(nèi)酯 （ABL）。
方法和結(jié)果：
采用高效液相色譜法檢測(cè)花粗提物中化合物 ABL 的含量。測(cè)試了復(fù)方 ABL 對(duì) Sphaerotheca fuliginea、Pseudoperonospora cubensis、Botrytis cinerea、Alternaria solani 和 Phytophthora infestans 的抑制作用。采用紫外光譜 （UV）、紅外光譜 （IR）、核磁共振 （NMR） 闡明了 ABL 對(duì)照品的化學(xué)結(jié)構(gòu)。ABL對(duì)照品純度為99.5%，滿足中藥對(duì)照品需求。采用高效液相色譜法測(cè)定粳稻花粗提液中ABL的含量（為2.45%），然后計(jì)算粳稻中ABL的含量（約為0.25%）。
結(jié)論：
化合物ABL對(duì)5種植物病原真菌的抑制活性不同，對(duì)致病假單胞菌的囊孢子萌發(fā)活性顯著，濃度為0.1 mg/mL時(shí)抑制率為100%。

1-o-乙酰溴化內(nèi)酯通過抑制 NF-κB 激活抑制炎癥反應(yīng)

采用免疫細(xì)胞化學(xué)和 Western blot 分析檢測(cè) NF-κB p65 的核轉(zhuǎn)位和 IκB-α， cyclo-oxygenase-2 （COX-2） 的表達(dá)。
方法和結(jié)果：
電泳遷移率變化測(cè)定 （EMSA） 檢測(cè) ABL 預(yù)處理的血管平滑肌細(xì)胞 （VSMC） 中 NF-κB 的 DNA 結(jié)合活性。蛋白質(zhì)印跡和免疫細(xì)胞化學(xué)分析顯示，脂多糖 （LPS） 處理導(dǎo)致 VSMC 中 NF-κB p65 核轉(zhuǎn)位增加，IκB-α 水平下降。然而，1-O-乙酰溴內(nèi)酯 （ABL） 預(yù)處理抑制了 LPS 誘導(dǎo)的 p65 核轉(zhuǎn)位和 IκB-α 的降解，ABL 的抑制作用呈濃度依賴性。LPS 使用 EMSA 增加了 LPS 誘導(dǎo)的 VSMC 核提取物與含有 NF-κB 結(jié)合位點(diǎn)的雙鏈寡核苷酸探針的結(jié)合。當(dāng)包括 100 倍過量的未標(biāo)記 NF-κB 寡核苷酸探針時(shí)，偏移帶被消除。ABL 預(yù)處理顯著降低了 NF-κB 的核水平，并降低了核提取物與 LPS 誘導(dǎo)的 DNA 探針的結(jié)合活性。此外，ABL 隨后抑制了 LPS 誘導(dǎo)的 NF-κB 依賴性 COX-2 基因的表達(dá)。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，ABL 可能是一種通過阻斷 NF-κB 激活來抑制 COX-2 基因表達(dá)的抗炎藥，從而抑制 VSMC 對(duì) LPS 的炎癥反應(yīng)。

為制備用于大英百科全書 （Inula Britannica L.） 質(zhì)量控制的對(duì)照品，提取 1-O-乙酰不列顛內(nèi)酯 （Inula Britannica L.） 并從氯仿提取中分離。
方法和結(jié)果：
通過紫外光譜 （UV）、紅外光譜 （IR）、核磁共振 （NMR） 和質(zhì)譜 （MS） 闡明 1-O-乙酰溴內(nèi)酯產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，結(jié)果與參考一致。1-O-乙酰溴內(nèi)酯產(chǎn)品純度為 99.5%，滿足中藥對(duì)照品需求。描述了一種高效液相色譜 - 蒸發(fā)光散射檢測(cè) （HPLC-ELSD） 的方法，用于測(cè)定 Inula Britannica L 中 1-O-乙酰不列顛內(nèi)酯。色譜條件包括 Hypersil ODS-2 色譜柱，以流速為 1.0 mL/min 的甲醇-水混合物 （52： 48， v/v） 作為流動(dòng)相。ELSD 的漂移管溫度為 90 °C，載氣流速為 2.5 L/min。1-O-乙酰不苯內(nèi)酯的線性范圍為 1.37 - 8.21 μLg （r = 0.999 8）。1-O-乙酰溴內(nèi)酯的平均回收率為 100.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 （RSD） 為 1.3% （n = 6）。
結(jié)論：
該方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、省時(shí)、重現(xiàn)性好。