ER 應(yīng)激和非瑟酮誘導(dǎo)人黑色素瘤細(xì)胞毒性中 ER 應(yīng)激和凋亡途徑激活。

非瑟酮素是一種膳食類黃酮，目前正在研究其在各種癌癥模型中的生長抑制特性。我們之前表明 Fisetin 在體外和體內(nèi)抑制黑色素瘤生長。
方法和結(jié)果：
在這里，我們評估了非瑟酮素誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)移性人黑色素瘤細(xì)胞毒性的分子基礎(chǔ)。Fisetin 治療在高度侵襲性 A375 和 451Lu 人黑色素瘤細(xì)胞中誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng) （ER） 應(yīng)激，這通過包括 IRE1α、XBP1s、ATF4 和 GRP78 在內(nèi)的 ER 應(yīng)激標(biāo)志物的上調(diào)所揭示。時(shí)程分析表明，ER 應(yīng)激與外源性和內(nèi)源性凋亡途徑的激活有關(guān)。非瑟酮處理的 2-D 黑色素瘤培養(yǎng)物顯示伴隨著細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)的自噬反應(yīng)。在 3-D 重組黑色素瘤模型中用 Fisetin 延長治療（16 天）導(dǎo)致黑色素瘤進(jìn)展受到抑制并伴有顯著細(xì)胞凋亡，處理過的構(gòu)建體中裂解的 Caspase-3 染色增加證明了這一點(diǎn)。然而，治療組和對照組之間自噬標(biāo)志物 LC-3 的表達(dá)沒有差異。對 2-D 黑色素瘤培養(yǎng)物的非瑟酮素處理導(dǎo)致參與多種細(xì)胞過程（包括自噬和細(xì)胞凋亡）調(diào)節(jié)的多功能 AMP 活化蛋白激酶 （AMPK） 的磷酸化和激活。沉默 AMPK 未能阻止細(xì)胞死亡，表明非瑟酮誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性是通過 AMPK 依賴性和非依賴性機(jī)制介導(dǎo)的。
結(jié)論：
綜上所述，我們的研究證實(shí)細(xì)胞凋亡是非瑟酮素抑制黑色素瘤細(xì)胞生長的主要機(jī)制，并且外源性和內(nèi)源性途徑的激活都有助于非瑟酮誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性。

多靶點(diǎn)神經(jīng)保護(hù)化合物漆黃素的化學(xué)修飾

許多因素與年齡相關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng) （CNS） 疾病有關(guān)，因此僅調(diào)節(jié)單個(gè)因素不太可能提供有效的治療。也許更好的方法是識別具有與維持大腦功能相關(guān)的多種生物活性的小分子。
方法和結(jié)果：
最近，我們確定了一種口服活性、神經(jīng)保護(hù)和認(rèn)知增強(qiáng)分子，類黃酮非瑟酮，它在幾種 CNS 疾病的動物模型中有效。非瑟酮具有直接的抗氧化活性，還可以增加主要內(nèi)源性抗氧化劑谷胱甘肽 （GSH） 的細(xì)胞內(nèi)水平。此外，非瑟酮具有神經(jīng)營養(yǎng)和抗炎活性。然而，它在基于細(xì)胞的測定中相對較高的 EC （50）、低親脂性、高拓?fù)錁O性表面積 （tPSA） 和較差的生物利用度表明藥物化學(xué)還有改進(jìn)的空間。
結(jié)論：
在這里，我們描述了一種多層篩選方法，該方法使我們能夠在體外神經(jīng)保護(hù)模型中鑒定活性顯著增強(qiáng)的非瑟酮衍生物，同時(shí)保持其他關(guān)鍵活性。

Hymenaea courbaril L. 的新鮮木質(zhì)部汁液及其主要成分非瑟酮的抗真菌和細(xì)胞毒性活性。

Hymenaea courbaril L （jatoba） 等植物的巨大潛力尚未得到科學(xué)探索，因此研究其藥理和毒理活性以確定其真正的療效和安全性非常重要。本研究調(diào)查了膜殼菌 （Hymenaea courbaril L） 木質(zhì)部汁液的細(xì)胞毒性及其對真菌 新型隱球菌 （Cryptococcus neoformans） 物種復(fù)合體和皮膚癬菌的生物活性。
方法和結(jié)果：
過濾 H. courbaril 的新鮮木質(zhì)部汁液，產(chǎn)生不溶性棕色沉淀，被鑒定為 Fisetin。在濾液中鑒定出非瑟酮伊甸醇、fustin、3-O-甲基-2,3-反式fustin 和 taxifolin 的混合物，通過肉湯微量稀釋抗真菌藥敏試驗(yàn)對新型隱球菌物種復(fù)合物和皮膚癬菌進(jìn)行評估。使用中性紅攝取 （NRU） 法篩選新鮮木質(zhì)部汁液和非瑟酮對 Balb/c 的 3T3-A31 細(xì)胞的細(xì)胞毒性。 新鮮木質(zhì)部汁液和非瑟酮的體外活性高于濾液。H. courbaril 的木質(zhì)部汁液抑制皮膚癬菌和新型隱球菌的生長，最小抑制濃度 （MIC） < 256 μg/mL，而非瑟酮顯示這些真菌的 MIC < 128 μg/mL。非瑟酮的毒性 （IC50 = 158 μg/mL） 低于新鮮木質(zhì)部汁液 （IC50 = 109 μg/mL）。
結(jié)論：
天然存在的非瑟酮可以為臨床應(yīng)用提供極好的起點(diǎn)，并且肯定代表對真菌感染的治療潛力，因?yàn)樗隗w外顯示出抗真菌活性和對動物細(xì)胞的低毒性。

非瑟酮通過 PKC/ROS/MAPK 通路抑制基質(zhì)金屬蛋白酶-9 激活，從而調(diào)節(jié) TPA 誘導(dǎo)的乳腺細(xì)胞侵襲。

侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤患者死亡的主要原因之一。非瑟酮（3,3'，4'，7-四羥基黃酮）是一種在煙樹 （Cotinus coggygria） 中發(fā)現(xiàn)的天然類黃酮，已知對前列腺癌和肺癌具有抗轉(zhuǎn)移作用;然而，非瑟酮對乳腺癌轉(zhuǎn)移的影響尚不清楚。
方法和結(jié)果：
本研究的目的是確定非瑟酮在人乳腺癌細(xì)胞中的抗侵襲活性?；|(zhì)金屬蛋白酶 （MMP）-9 是促進(jìn)許多癌癥腫瘤細(xì)胞類型侵襲的主要成分，因此本研究研究了非瑟酮對 12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯 （TPA） 刺激的人乳腺癌細(xì)胞中 MMP-9 表達(dá)的抑制作用。漆黃素顯著減弱 TPA 誘導(dǎo)的 MCF-7 人乳腺癌細(xì)胞侵襲，并被發(fā)現(xiàn)抑制 PKCα/ROS/ERK1/2 和 p38 MAPK 信號通路的激活。這種作用進(jìn)一步與 NF-κB 活化的減少有關(guān)，表明非瑟酮對 MCF-7 細(xì)胞的抗侵襲作用可能是由于 NF-κB 的 TPA 激活受到抑制，PKCα/ROS/ERK1/2 和 p38 MAPK 信號的 TPA 激活減少，最終導(dǎo)致 MMP-9 表達(dá)的下調(diào)。
結(jié)論：
我們的研究結(jié)果表明非瑟酮在 MCF-7 細(xì)胞侵襲中的作用，并闡明了這種作用的潛在分子機(jī)制，表明非瑟酮是乳腺癌轉(zhuǎn)移的潛在化學(xué)預(yù)防劑。

非瑟酮通過抑制絲裂原活化蛋白激酶/基質(zhì)金屬蛋白酶途徑和核因子-κB 途徑來改善光損傷。

紫外線 （UV） 照射是導(dǎo)致皮膚光損傷的最重要外在因素之一。紫外線照射后，皮膚中的一系列信號轉(zhuǎn)導(dǎo)將被激活，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和光老化皮膚。 在這項(xiàng)研究中，非瑟酮素是一種存在于水果和蔬菜中的黃酮醇，研究了其光保護(hù)作用。
方法和結(jié)果：
5-25 μM 非瑟酮抑制紫外線 B （UVB） 照射誘導(dǎo)的人皮膚成纖維細(xì)胞中環(huán)氧合酶-2 （COX-2） 和基質(zhì)金屬蛋白酶 （MMP） -1 、 MMP-3 、 MMP-9 的表達(dá)。此外，非瑟酮抑制 UVB 誘導(dǎo)的膠原蛋白降解。關(guān)于其對上游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響，我們發(fā)現(xiàn)非瑟酮降低了紫外線 （UV） 誘導(dǎo)的絲裂原活化蛋白激酶 （MAP 激酶） 通路中 ERK 、 JNK 和 p38 磷酸化的表達(dá)。此外，非瑟酮減少了抑制劑 κB （IκB） 的降解并增加了細(xì)胞質(zhì)中 p65 的數(shù)量，p65 是核因子-κB （NF-κB） 的主要亞基。它還抑制 NF-κB 易位到細(xì)胞核，并抑制磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B/CREB （PI3K/AKT/CREB） 通路中的 cAMP 反應(yīng)元件結(jié)合蛋白 （CREB） Ser-133 磷酸化水平。
結(jié)論：
最后，非瑟酮抑制紫外線誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)活性氧 （ROS） 、前列腺素 E2 （PGE2） 和一氧化氮 （NO） 的產(chǎn)生。上述作用和機(jī)制表明 Fisetin 可用于開發(fā)光保護(hù)劑。

漆黃素在用脂多糖處理的人牙齦成纖維細(xì)胞中的抗炎活性。

Fisetin 通過抑制 mTOR-C/EBPα 信號傳導(dǎo)抑制 GLUT4 介導(dǎo)的葡萄糖攝取，從而抑制小鼠脂肪細(xì)胞 3T3-L1 細(xì)胞中的脂質(zhì)積累。

3,7,3'，4'-四羥基黃酮 （Fisetin） 是一種在蔬菜和水果中發(fā)現(xiàn)的類黃酮，具有廣泛的生物活性。 本文研究了非瑟酮對小鼠脂肪細(xì)胞 3T3-L1 細(xì)胞脂肪生成的影響及其調(diào)節(jié)機(jī)制。
方法和結(jié)果：
非瑟酮抑制細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的積累，降低脂肪生成過程中過氧化物酶體增殖物激活受體γ和 CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白 （C/EBP） α和脂肪酸結(jié)合蛋白 4 （aP2） 等成脂基因的表達(dá)。此外，非瑟酮處理降低了參與脂肪酸生物合成 （脂肪生成） 的乙酰輔酶 A 羧化酶、脂肪酸合酶和硬脂酰輔酶 A 去飽和酶等基因的 mRNA 水平。非瑟酮也降低了葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 4 （GLUT4） 基因的表達(dá)水平，導(dǎo)致葡萄糖攝取下調(diào)。此外，非瑟酮抑制哺乳動物雷帕霉素靶標(biāo) （mTOR） 和 p70 核糖體 S6 激酶的磷酸化，p70 核糖體 S6 激酶是 mTOR 復(fù)合物的靶標(biāo)，抑制后 C/EBPα 基因的 mRNA 水平降低。染色質(zhì)免疫沉淀測定獲得的結(jié)果表明，用非瑟酮處理降低了 C/EBPα 與 GLUT4 基因啟動子結(jié)合的能力，這與在雷帕霉素（一種 mTOR 抑制劑）存在下允許 3T3-L1 細(xì)胞在培養(yǎng)基中分化為脂肪細(xì)胞時(shí)獲得的能力非常吻合。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，非瑟酮通過抑制 3T3-L1 細(xì)胞中的 mTOR-C/EBPα 信號傳導(dǎo)來抑制 GLUT4 介導(dǎo)的葡萄糖攝取，從而抑制細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的積累。

非瑟酮是一種抗炎類黃酮;然而，它的抗炎機(jī)制尚不清楚。 在這項(xiàng)研究中，我們評價(jià)了非瑟酮的抗炎作用及其與絲裂原活化蛋白激酶 （MAPK） 和核因子 kappa-β 通路在用牙齦卟啉單胞菌脂多糖 （LPS） 處理的人牙齦成纖維細(xì)胞 （HGF） 中的相關(guān)性。
方法和結(jié)果：
通過細(xì)胞活力測定 （MTT） 、 Western blotting 和 COX-2 逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應(yīng)分析，測量不同濃度 （0 、 1 、 5 、 10 和 15 μM） 非瑟酮處理的 HGF 的細(xì)胞信號傳導(dǎo)、細(xì)胞活力和環(huán)氧合酶-2 （COX-2） 表達(dá)。我們發(fā)現(xiàn) Fisetin 顯著降低了 LPS 處理的 HGF 中前列腺素 E2 的合成和表達(dá)。在用 LPS 處理的 HGF 中，F(xiàn)isetin 始終抑制細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶、 c-Jun N 末端激酶和 p38 MAPK 的激活。
結(jié)論：
數(shù)據(jù)表明 Fisetin 抑制 MAPK 活化和 COX-2 表達(dá)，而不影響細(xì)胞活力。這些發(fā)現(xiàn)可能有助于理解非瑟酮對牙周病影響的機(jī)制。