乙酰膽堿酯酶（acetylcholinesterase，AchE）活性測(cè)定試劑盒說明書 

分光光度法 50 管/48 樣 

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

AchE 屬于絲氨酸水解酶，廣泛存在于各種動(dòng)物組織和血清中。AchE 催化乙酰膽堿（Ach）水解，在 神經(jīng)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)中起重要作用。 

測(cè)定原理：

AchE 催化 Ach 水解生成膽堿，膽堿與二硫?qū)ο趸郊姿幔?/span>DTNB）作用生成 5-巰基-硝基苯甲酸（TNB）； TNB 在 412nm 處有吸收峰，通過測(cè)定 412 nm 吸光度增加速率，計(jì)算 AchE 活性。

自備儀器和用品： 

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

粗酶液提?。?/span>

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取 液）進(jìn)行冰浴勻漿，8000g 4℃離心 10min，取上清液待測(cè)。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10 4個(gè)）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加 入 1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；然后 8000g， 4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血清等液體：直接測(cè)定。