乙醇含量測定試劑盒說明書
可見分光光度法 50管/48樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
乙醇俗稱酒精,是最常見的一元醇,在檢測酒的質(zhì)量、分析血液乙醇含量和果蔬品質(zhì)判斷中通常需要 頻繁、大量地檢測乙醇含量。 1.乙醇是酒的主要成分,是衡量酒質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。我國是世界上最早發(fā)明釀酒的國家,也是酒類產(chǎn) 品消費(fèi)大國,其消費(fèi)量居世界之首。因此,快速、準(zhǔn)確測定酒中乙醇含量,對于確保酒的質(zhì)量和保護(hù)消費(fèi) 者的健康具有重大意義。 2.乙醇是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最基本的抑制物,如果乙醇被大量攝入,會(huì)不可逆抑制呼吸甚至導(dǎo)致死亡,血液中 乙醇檢測結(jié)果通常作為認(rèn)定是否酒后駕駛或醉酒駕駛的依據(jù)。 3.乙醇是判斷儲(chǔ)藏過程中果蔬品質(zhì)變化的重要指標(biāo),研究表明,適當(dāng)?shù)囊掖继幚砟軌驕p少腐爛和減輕果蔬 生理病害、延緩果蔬成熟和衰老進(jìn)程,從而延長貨架壽命。因此,簡便、準(zhǔn)確和快速測定果蔬中乙醇含量 具有非常重要的意義。
測定原理:
乙醇在乙醇脫氫酶的催化下氧化脫氫生成乙醛,同時(shí),NAD 被還原生成 NADH,NADH 在 1-mPMS 的 作用下使 WST-8 顯橙黃色,通過 450 nm 下測定吸光值變化可測得乙醇含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
乙醇提取:
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 蒸餾 水),進(jìn)行勻漿,8000g,25℃離心 10min,取上清待測。
2. 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(10 4個(gè)):蒸 餾水體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 蒸餾水),超聲波破碎(冰浴, 功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次), 8000g,25℃離心 10min,取上清待測。
3. 血清(漿)等液體樣品:直接測定。
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