特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì)? 利用超靈敏的熒光探針DCFH-DA 進(jìn)行活性氧ROS檢測(cè)
                 ? 提供了詳細(xì)的操作步驟
                 ? 適合流式細(xì)胞儀和熒光顯微鏡檢測(cè)活性氧水平

試劑盒組分? DCFH-DA (10 mM)
                 ?PositiveControl(50mM)

使用中注意事項(xiàng)? 不同批次號(hào)、不同廠家之間的組分不要混用；否則，可能導(dǎo)致結(jié)果異常。
? 混合或復(fù)溶組分時(shí)，避免產(chǎn)生氣泡。
? 勤換吸頭，避免各組分之間的交叉污染。
? 實(shí)驗(yàn)開始前，確保所有的組分及設(shè)備處于合適的溫度。
? 陽性對(duì)照H2O2一般使用濃度為100 μM （推薦濃度50-200 μM，具體依細(xì)胞類型而定） 。通常刺激后30 min-4 h可以觀察到顯著的活性氧水平升高。對(duì)于不同的細(xì)胞，活性氧陽性對(duì)照的效果可能有較大的差別。如果在刺激后30 min內(nèi)觀察不到活性氧的升高，可延長誘導(dǎo)時(shí)間或適當(dāng)提高活性氧陽性對(duì)照的濃度。如果熒光信號(hào)過強(qiáng)，可縮短誘導(dǎo)時(shí)間或適當(dāng)降低活性氧陽性對(duì)照的濃度。
? 實(shí)驗(yàn)過程中，如果陰性對(duì)照細(xì)胞熒光也比較強(qiáng)，可以按照1:2000-1:5000 稀釋熒光探針DCFH-DA，使DCFH-DA的終濃度為 2-5 μM。探針裝載的時(shí)間可在15-60 min 內(nèi)適當(dāng)進(jìn)行調(diào)整，盡量縮短讀片時(shí)的曝光時(shí)間，并且試驗(yàn)組、對(duì)照組曝光時(shí)間需保持一致。
? 活性氧陽性對(duì)照 (H2O2) 僅僅用于作為陽性對(duì)照的樣品，并非所有試驗(yàn)組樣品中都需加入活性氧陽性對(duì)照。
? 探針裝載后，一定要洗凈未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的探針，否則會(huì)導(dǎo)致背景較高。
? 盡量縮短探針裝載后到檢測(cè)所用的時(shí)間（刺激時(shí)間除外），以減少各種可能的誤差。