羥自由基清除能力測(cè)定試劑盒說明書
微量法 100T/96S
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝 紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得 到廣泛應(yīng)用。
測(cè)定原理:
H2O2/ Fe 2+ 通過 Fenton 反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,將鄰二氮菲- Fe 2+水溶液中 Fe 2+氧化為 Fe 3+ ,導(dǎo)致 536nm 吸光度下降,樣品對(duì) 536nm 吸光度下降速率的抑制程度,反映了樣品清除羥自由基的能力。
自備儀器和用品:
恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96 孔板和蒸餾水。
樣品的制備:
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取 液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2. 血清、果汁等液體樣品可直接測(cè)定。
3. 提取物(或者藥物)可配制成一定濃度,如 5 mg/ml。
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