谷氨酸(glutamic acid,Glu)含量測定試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
Glu 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是組成蛋白質(zhì)的 20 種氨基酸之一,而且通過 轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外,Glu 還是味精的主要有效成分, 常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
測定原理:
利用專用提取液提取,然后用顯色劑進(jìn)行顯色,顯色后在 570nm 下進(jìn)行測定。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
谷氨酸提?。?/span>
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞樣品:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(10 4 個):試劑一體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 1000 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 2ml 試劑一),超聲波破 碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 常溫離心 10min,取 上清,置冰上待測。
2、組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.2g 組織,加入 2ml 試劑一),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 常溫離心 10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)或細(xì)胞培養(yǎng)液樣品:按照血清(漿)或細(xì)胞培養(yǎng)液體積(ml):試劑一體積(ml)為 1: 5~10 的比例(建議取 0.2ml 血清(漿)或者細(xì)胞培養(yǎng)液加入 2ml 試劑一),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 常溫離 心 10min,取上清,置冰上待測。
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