抗性淀粉檢測試劑盒-分光法50T

前言

抗性淀粉（RS）是指在人小腸內(nèi)不能被酶解的淀粉，在大腸部分或完全發(fā)酵。RS 是總膳食纖維的組分之一?？剐缘矸鄣臏y定方法： 樣品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶（AMG）37℃振蕩水浴孵育16 小時，在這期間，通過兩種酶的聯(lián)合作用，非抗性淀粉被溶解，水解成 D-葡萄糖，孵育結(jié)束后，加入等體積的乙醇或工業(yè)甲基化酒精（IMS,變性乙醇）終止反應(yīng)。離心上述溶液，收集上清勿棄，底部殘留絮狀團即為樣品中的RS，用含水的 IMS 或乙醇（50%v/v）洗滌絮狀團，洗滌后離心，再重復(fù)一次洗滌離心，收集離心后獲得的上清，與之前收集的上清混合。小心倒出試管殘留的液體，將絮狀團置于冰水浴中，加入 2M KOH 溶解，溶解的同時用磁力攪拌機劇烈攪拌。用醋酸鹽緩沖液將這個溶液調(diào)至中性，用 AMG 將淀粉定量水解成葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過氧化物酶試劑（GOPOD）測定，這也是對樣品中 RS 含量的測定。非抗性淀粉（可溶性淀粉）的測定可通過集中的上清液并定容至 100mL，再用 GOPOD 測定 D-葡萄糖完成。

應(yīng)用性和精確性

這個方法需要樣品中 RS 含量多于 2% w/w，如 RS 含量多于 2% w/w，常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)誤差為±5%，少于2%w/wRS的誤差更高。

需要的儀器設(shè)備

1. 離心式粉碎機，帶有齒輪轉(zhuǎn)子和 1.0mm 篩子，或類似的裝置；小型樣品可選擇磨碎機替代。

   2. 絞肉機-手動或電動的，裝有 4.5mm 篩

   3. 臺式離心機

   4. 振蕩水浴器，可設(shè)定為每分鐘 100 次直線運動（振蕩速度為每分鐘 200 里程），振蕩距離35mm,37℃

   5. 水浴鍋

   6. 渦旋儀

   7. 磁力攪拌器

   8. 磁力攪拌棒-5×15mm

   9. pH 計

   10. 計時器

   11. 分析天平（精確到 0.1mg）

   12. 分光光度計-能夠設(shè)定 510nm（10mm 路徑長度）

   13. 100μL 移液器及一次性槍頭

   14. 連續(xù)分配器配有 50mL 管嘴，能夠移取 2.0mL，3.0mL 和 4.0mL

   15. 溫度計-能夠讀取 37+0.1℃和 50+0.1℃

   16. 容量瓶-100mL，200mL，500mL，1L，2L