鹽酸棕櫚堿對(duì)結(jié)腸腺癌 HT-29 細(xì)胞的光動(dòng)力作用。

鹽酸棕櫚堿 （PaH） 是一種來(lái)自傳統(tǒng)中藥 （TCM） 的天然活性化合物。本研究旨在評(píng)估 PaH 作為一種新的光敏劑在光照射下對(duì)結(jié)腸腺癌 HT-29 細(xì)胞的影響。
方法和結(jié)果：
首先，分別使用紫外-可見分光光度計(jì)和 RF-1500PC 分光光度計(jì)測(cè)量 PaH 的吸收和熒光光譜。使用 1,3-二苯基異苯并呋喃 （DPBF） 測(cè)定 PaH 的單線態(tài)氧 （（1）O2） 產(chǎn)量。使用 3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四唑溴化物 （MTT） 測(cè)定法估計(jì) PaH 的暗毒性。在不同的時(shí)間間隔檢測(cè)到 HT-29 細(xì)胞中 PaH 的細(xì)胞攝取。使用共聚焦激光熒光顯微鏡觀察 PaH 在 HT-29 細(xì)胞中的蝶基下定位。對(duì)于光動(dòng)力處理，HT-29 細(xì)胞與 PaH 一起孵育，然后用 LED 光源的可見光 （470nm） 照射。使用 MTT 測(cè)定法在光動(dòng)力處理后 24 小時(shí)研究光細(xì)胞毒性。使用膜聯(lián)蛋白 V/PI 染色的流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行光動(dòng)力處理后 18 小時(shí)觀察到細(xì)胞凋亡。結(jié)果表明，PaH 在 400 nm 至 500 nm 的可見光區(qū)域具有吸收峰，在 406 nm 處具有熒光發(fā)射峰，激發(fā)波長(zhǎng)為 365 nm。來(lái)自 LED 光源的 470nm 可見光激活 PaH 以產(chǎn)生 （1）O2。暗毒性顯示，單獨(dú) PaH 治療孵育 24 h 后對(duì) HT-29 癌細(xì)胞和 NIH-3T3 正常細(xì)胞無(wú)細(xì)胞毒性。孵育 40 min 后，細(xì)胞對(duì) PaH 的攝取達(dá)到最大值，PaH 位于線粒體中。PaH 的光動(dòng)力處理對(duì) HT-29 細(xì)胞具有顯著的光細(xì)胞毒性。細(xì)胞死亡率以 PaH 濃度依賴性和輕劑量依賴性方式顯著增加。進(jìn)一步評(píng)估顯示，在光動(dòng)力處理濃度為 5μM、能量密度為 10.8J/cm 的 PaH 后，HT-29 細(xì)胞的早期和晚期凋亡率顯著增加，分別高達(dá) 21.54% 和 5.39% （2）。
結(jié)論：
我們的研究結(jié)果表明，PaH 作為一種天然存在的光敏劑，在結(jié)腸腺癌的光動(dòng)力治療中具有潛力。