QIAGEN Plasmid Maxi Kit (25)是QIAGEN公司生產(chǎn)的一款質(zhì)粒提取試劑盒,主要用于從細(xì)菌中高效純化轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒DNA。該試劑盒采用重力流陰離子交換柱技術(shù),能夠純化至多10mg的轉(zhuǎn)染級質(zhì)?;蚩滤官|(zhì)粒DNA。產(chǎn)量可達(dá)10mg(Giga)、2.5mg(Mega)、500μg(Maxi)或100μg(Midi)高拷貝質(zhì)粒DNA,具體產(chǎn)量取決于質(zhì)??截悢?shù)、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基等因素。
使用QIAGEN Plasmid Maxi Kit (25)進(jìn)行質(zhì)粒提取時(shí),操作簡便快捷。通過中和的細(xì)菌裂解物直接在QIA過濾器濾芯中孵育,并通過過濾快速清除細(xì)菌裂解物,然后將澄清的裂解物加載到陰離子交換尖端,質(zhì)粒DNA在適當(dāng)?shù)牡望}和pH條件下選擇性結(jié)合。通過中鹽洗滌除去雜質(zhì)后,在高鹽緩沖液中洗脫超純質(zhì)粒DNA。最后,DNA通過異丙醇沉淀濃縮和脫鹽,并通過離心收集。整個(gè)過程中避免了使用有毒物質(zhì),如苯酚、氯仿、溴化乙錠和氯化銫等,最大限度地減少了對用戶和環(huán)境的危害。
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