本品產僅供科研

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產品名稱：基因染料法熒光定量PCR試劑盒

產品規(guī)格：50次/盒

本產品就是根據PCR原理專門開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。

2. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

3. 產品精心優(yōu)化且特異性高，引物是根據高度保守區(qū)設計，不會跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應。

4. PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。

5. 本產品足夠50次20μL體系的PCR反應。

6. 本產品只能用于定性實驗，不能用于定量。

7. 本產品只能用于科研

基因染料法熒光定量PCR試劑盒樣品的制備　
1. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取反應，多出的兩個中一個是 PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 牛乳頭瘤病毒 PCR 陽性對照（1×10E6 拷貝/μL，本試劑盒提供）再加上一定量的水作為制備的陽性對照（加水后其總體積跟樣品一樣，樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求）。可以用水作為制備的陰性對照。

2. 用自選方法純化上述 N+2 個樣品的 DNA。本試劑盒跟市場上大多數細菌DNA提取試劑盒兼容。

電泳分析　

1. 取 5-10uL 擴增產物進行常規(guī)瓊脂糖電泳，檢測擴增效果，由于擴增產物較短，建議用 1.5%-2.0%的瓊脂糖凝膠。

2. 陽性樣品預期得到的擴增產物長度為 200bp 左右。如果兩個陰性對照（樣品制備陰性對照或 PCR 陰性對照）有此擴增產物，說明環(huán)境污染，則整個實驗無效，不需要分析實驗結果。

3. 如果所有樣品和 PCR 陽性對照均無此擴增產物，則說明有系統性的問題（試劑、設備、程序、操作等），需要重復并排查原因。

4. 如果沒有上述兩種情況，則實驗有效，可以分析樣品的擴增結果。N+2 個樣品中有擴增產物的判定為陽性，無則判定為陰性。

基因染料法熒光定量PCR試劑盒樣本采集、存放及運輸：

1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；

2、運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。陽性對照需單獨放置，不要污染其他試劑。

3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。

4、自備試劑：樣品DNA。

基因染料法熒光定量PCR試劑盒注意事項

1 所有操作嚴格按照說明書進行；

2試劑盒內各種組分使用前應自然融化，混勻并短暫離心；

3 反應液應避光保存；

4反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染；

7 實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

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