小鼠胚胎干細(xì)胞E14，培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001）。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時購買完培，同時購買非常優(yōu)惠 |
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
小鼠胚胎干細(xì)胞E14，培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超80%，即可進行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進行分瓶傳代（兩個T25瓶），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意佩戴防護面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
小鼠胚胎干細(xì)胞E14，售后條款：
1）細(xì)胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？
1. 細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2. 細(xì)胞污染問題，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)，給我們提出真實的實驗結(jié)果，核實后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細(xì)胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，核實后予重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2）細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
歡迎新老客戶咨詢訂購：小鼠胚胎干細(xì)胞E14
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| GT1799C | BEND3 | 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株BEND.3 | 1500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1800C | neuro2a | 小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞neuro2a | 1500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1801C | G422 | 小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞G422 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1802C | ID8 | 小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞ID8 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S+貼壁 |
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| GT1804C | EL4 | 小鼠淋巴瘤細(xì)胞EL4 | 1800 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%馬血清(或FBS)+1%P/S |
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| GT1809C | GC1spg | 小鼠精原細(xì)胞系GC1spg | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1810C | MC38 | 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MC38 | 1500/3000 | DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%HEPES+1%P/S |
| GT1811C | CT26 | 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞CT26 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1812C | CT26WT | 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞CT26.WT | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1813C | GL261 | 小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤GL261 | 2500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
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| GT1815C | B16 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16 | 1350 | 1640（或IMDM）+10%FBS+1%P/S |
| GT1816C | B16B | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16B | 1350 | 1640+10%小牛血清+1%P/S貼壁 |
| GT1817C | B16F10 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16F10 | 1500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%P/S |
| GT1818C | HT22 | 小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞HT22 | 1800 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1819C | MLOY4 | 小鼠骨樣細(xì)胞MLOY4 | 1800 | MEMa+5%FBS+5%小牛血清+1%P/S鼠尾膠原包被 |
| GT1820C | Sp20 | 小鼠骨髓瘤細(xì)胞Sp20 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S圓形貼壁，傳代時不可吹打?。?！使其自然脫落 |
| GT1821C | Sp20Ag14 | 小鼠骨髓瘤細(xì)胞Sp20Ag14 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S懸浮不要用力吹打(生長時會沉到瓶底） |
| GT1822C | OP9 | 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞OP9 | 1500 | MEMa+20%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1823C | K7M2WT | 小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞K7M2WT | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1824C | TM3 | 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞TM3 | 1500 | DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S貼壁 |
| GT1825C | AML12 | 小鼠肝實質(zhì)細(xì)胞AML12 | 1800 | D/F12+10%FBS+1%ITS（10ug/mL胰島素；轉(zhuǎn)鐵蛋白5.5ug/mL;5ng/mL硒）+40ng/ml地塞米松+1%P/S |
| GT1826C | HEPA16 | 小鼠肝癌細(xì)胞HEPA16 | 1500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%丙酮酸納+1%P/S貼壁 |
| GT1827C | H22 | 小鼠肝癌細(xì)胞H22 | 1500 | RPMI-1640+10%FBS |
| GT1828C | S180 | 小鼠腹水瘤細(xì)胞S180 | 1800 | 1640含NaHCO31.5g/L)+g/LUCose2.5g/L+SodiumPyruvate0.11g/L+10%FBS+1%P/S |
| GT1829C | MLE12 | 小鼠肺上皮細(xì)胞MLE12 | 1500 | DMEM/F12+1%ITS（10ug/mL胰島素；轉(zhuǎn)鐵蛋白5.5ug/mL;5ng/mL硒）+10nM氫化可的松+10nM雌二醇+10mMhepes+2mML-谷氨酰胺+2%胎牛血清 |
| GT1830C | MHS | 小鼠肺泡巨噬細(xì)胞MHS | 1500 | 1640+10%FBS+0.05mM巰基乙醇（β-Me）半貼 |
| GT1831C | LL2（LLC1） | 小鼠肺癌細(xì)胞LL2（LLC1） | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1832C | LLC | 小鼠肺癌細(xì)胞LLC | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1833C | P815 | 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞P815 | 1350 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮，少量貼壁 |
| GT1834C | RAW2647 | 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞RAW264.7 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁，傳代時密度要大，易分化 |
| GT1835C | J774A1 | 小鼠單核巨噬細(xì)胞J774A.1 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1836C | L929 | 小鼠成纖維細(xì)胞/結(jié)締組織成纖維細(xì)胞L929 | 1500 | MEM+10%HS(馬血清）+1%P/S |
| GT1837C | NCTCclone929 | 小鼠成纖維細(xì)胞/結(jié)締組織成纖維細(xì)胞NCTCclone929 | 1500 | MEM+10%HS(馬血清)+1%P/S貼壁 |
| GT1838C | C2C12 | 小鼠成肌細(xì)胞C2C12 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S,C2C12細(xì)胞生長較快，培養(yǎng)時細(xì)胞密度不可過高，否則容易分化 |
| GT1839C | MB49 | 小鼠膀胱癌細(xì)胞MB49 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
關(guān)鍵字： 小鼠胚胎干細(xì)胞E14;細(xì)胞E14;小鼠胚胎干細(xì)胞;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
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