旨在篩選柴胡(一種傳統(tǒng)中草藥)的活性成分,并利用人神經母細胞瘤SH-SY5Y細胞發(fā)現新型抗精神分裂癥候選藥物。在細胞膜色譜(CMC)模型中,使用SH-SY5Y細胞制備固定相。方法和結果:采用SH-SY5Y/CMC模型收集保留組分,然后在優(yōu)化的離線條件下通過GC/MS進行分析。在研究了以氨磺必利和氟哌啶醇為標準化合物的SH-SY5Y/CMC方法的適用性和可靠性后,將該方法應用于柴胡提取物中活性成分的篩選。SH-SY5Y/CMC模型的保留成分為柴胡皂苷A、柴胡皂苷B1、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C和柴胡皂苷D,采用GC/MS法鑒定。體外藥理試驗-MTT、柴胡皂苷B1、柴胡皂苷B2和柴胡皂苷C均能保護SY5Y細胞。柴胡皂苷B1和柴胡皂苷C的保護作用呈濃度依賴性。柴胡皂苷A和柴胡皂苷D在濃度大于30 μg/mL時抑制細胞活力(P<0.05)。通過SH-SY5Y/CMC方法和SH-SY5Y MTT試驗,我們快速檢測出柴胡的靶成分,準確鑒定,并發(fā)現其對SH-SY5Y細胞的不同影響。結論:柴胡皂苷B1、柴胡皂苷B2和柴胡皂苷C可作為抗精神分裂癥候選藥物。
眾所周知,在重組膠原凝膠中培養(yǎng)的成纖維細胞會收縮凝膠,從而產生與真皮中相當的高密度膠原纖維。我們之前的研究表明,即使沒有明顯的細胞間接觸,收縮的膠原凝膠中的人成纖維細胞在10%血清存在下也不會增殖。我們將這種細胞生長抑制解釋為由高水平的細胞-膠原纖維相互作用或細胞-基質接觸抑制引起的。方法和結果:本研究比較了表皮生長因子(EGF)對收縮膠原凝膠中成纖維細胞增殖的影響與對其他靜止狀態(tài)細胞的影響。在塑料培養(yǎng)皿或膠原凝膠上匯合的非分裂細胞對添加的EGF有反應并繁殖,而收縮的膠原凝膠中的細胞在濃度高達100ng/ml時對EGF沒有表現出任何生長反應。[125I]-EGF與細胞的結合試驗表明,收縮的膠原凝膠中結合位點的數量和Scatchard分析得到的結合常數基本沒有變化,表明EGF受體沒有被膠原纖維掩蓋,但EGF結合后的信號轉導被阻斷。通過添加柴胡皂苷 B1 抑制了信號轉導中的阻滯。結論:這些結果表明,收縮膠原凝膠中的靜止成纖維細胞與先前已知的培養(yǎng)細胞的靜止狀態(tài)不同,即由于匯合時細胞間接觸抑制或生長因子缺乏而導致的靜止狀態(tài)。討論了具有強效皂苷活性的柴胡皂苷B1的作用機理。
收集并獲得的每個餾分并干燥,從700 mg注射樣品中產生以下五種柴胡皂苷:柴胡皂苷B1(8.7 mg),柴胡皂苷A(86 mg),柴胡皂苷B3(17 mg),柴胡皂苷B2(41 mg)和柴胡皂苷C(33 mg)。柴胡皂苷A在24小時后對人癌細胞(胃癌,AGS細胞;乳腺癌,MCF-7細胞;和肝瘤,HepG2細胞)顯示出最強的細胞毒性。上述3種細胞類型的IC50值分別為34.6、33.3和23.4 μmol/L。
柴胡皂苷B1是一種從傘形科植物柴胡中提取的活性成分,以下是關于柴胡皂苷B1的詳細介紹:
中文名:柴胡皂苷B1
外文名:Saikosaponin B1
化學式:C42H68O13
分子量:780.98(也有文獻報道為780.982)
CAS號:58558-08-0
熔點:235~238℃
密度:1.4±0.1 g/cm3
沸點:909.9±65.0°C at 760 mmHg
閃點:504.1±34.3°C
折射率:1.619
蒸汽壓:0.0±0.6 mmHg at 25°C
PSA:218.99000
LogP:3.59
外觀:白色無定形粉末
柴胡皂苷B1主要來源于傘形科植物柴胡(如北柴胡Bupleurum chinense DC.或狹葉柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd.)的干燥根。
可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑。
在常溫下性質相對穩(wěn)定,但為保持其最佳活性,通常建議儲存在特定條件下。
保護肝膽:柴胡皂苷B1具有顯著的保肝利膽作用,能夠改善肝臟功能,促進膽汁分泌。
解熱鎮(zhèn)靜:具有解熱和鎮(zhèn)靜作用,有助于緩解發(fā)熱和焦慮等癥狀。
抗炎作用:能夠抑制炎癥反應,減輕炎癥對組織的損傷。
免疫調節(jié):能夠調節(jié)免疫系統(tǒng)功能,增強機體抵抗力。
抗癌作用:研究表明,柴胡皂苷B1能夠增強癌癥化療效果,對癌細胞具有一定的抑制作用。
中藥研究:作為中藥柴胡的主要活性成分之一,柴胡皂苷B1在中藥研究中具有重要地位。
藥理實驗:常用于藥理實驗中,以研究其藥理作用和機制。
含量測定與鑒別:用于中藥材及中藥制劑中柴胡皂苷B1的含量測定和鑒別。
保健品與藥物開發(fā):具有潛在的保健品和藥物開發(fā)價值,可用于輔助治療或保健。
柴胡皂苷B1應在2~8℃條件下冷藏保存,以確保其穩(wěn)定性和活性。避免長時間暴露在高溫、潮濕或陽光直射的環(huán)境中。
柴胡皂苷B1僅供科研使用或按照相關規(guī)定用于特定領域,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途。
在使用柴胡皂苷B1時,應遵循相關操作規(guī)程和安全規(guī)范,避免對人體和環(huán)境造成危害。
綜上所述,柴胡皂苷B1是一種具有多種生物活性的化學物質,在中藥研究、藥理實驗等領域具有廣泛的應用前景。同時,也需要注意其儲存條件和使用注意事項。
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王玲