建立了一種簡(jiǎn)便、特異、靈敏的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)方法,并驗(yàn)證了以葛根素為內(nèi)標(biāo)(IS)同時(shí)測(cè)定大鼠血漿中新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸和梔子苷的方法。方法和結(jié)果:血漿樣品在酸化后使用低至 50 μL 血漿的乙腈通過(guò)一步直接蛋白質(zhì)沉淀程序進(jìn)行預(yù)處理。在Acquity BEH C18色譜柱(100 × 2.1 mm,1.7 μm)上以0.2 mL/min的流速,采用梯度洗脫法,使用0.2%乙酸-甲醇作為流動(dòng)相進(jìn)行色譜分離。在三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀上,通過(guò)電噴霧電離源和負(fù)離子模式進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測(cè),進(jìn)行檢測(cè)。校準(zhǔn)曲線在較寬的濃度范圍內(nèi)顯示出良好的線性(r > 0.995)。日內(nèi)和日間精度均為<15%,準(zhǔn)確率在±8.0%以內(nèi)。結(jié)論:該方法成功應(yīng)用于靜脈注射Reduning注射后大鼠4種生物活性成分的藥代動(dòng)力學(xué)研究。
通過(guò)NMR和MS分析鑒定了從李子(Prunus domestica L.)中分離得到的新綠原酸(3-CQA)和隱綠原酸(4-CQA)。此外,通過(guò)高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定了李子中綠原酸異構(gòu)體的含量。這些異構(gòu)體3-CQA、4-CQA和綠原酸(5-CQA)的比例為78.7:18。分別為4:3.9。首次在李子中鑒定并定量了4-CQA,該異構(gòu)體的含量相對(duì)較高。還評(píng)價(jià)了綠原酸異構(gòu)體的抗氧化活性,如對(duì)超氧陰離子自由基的清除活性和對(duì)亞油酸甲酯氧化的抑制作用。每種異構(gòu)體的抗氧化活性幾乎相同。
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王玲