來自冬蟲夏草的過氧化麥角甾醇可改善TGF-β1誘導(dǎo)的腎成纖維細(xì)胞活化。

慢性腎病是一個日益嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題，迫切需要新的藥物。過氧化麥角甾醇（EP）是冬蟲夏草蟬盛（C. cicadae）產(chǎn)生的主要甾醇，是一種廣泛使用的中藥。蟬已被用于治療多種疾病，并具有潛在的腎臟保護益處。 本研究旨在探討EP的抗纖維化作用及其潛在機制。
方法與結(jié)果：
通過轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）刺激正常大鼠腎成纖維細(xì)胞系（NRK-49F）進(jìn)行成纖維細(xì)胞活化，并應(yīng)用EP處理，探索其潛在的抗纖維化作用。使用MTT分析研究細(xì)胞增殖。使用免疫組化和/或蛋白質(zhì)印跡分析纖維化相關(guān)蛋白表達(dá)。EP治療減弱了TGF-β1誘導(dǎo)的腎成纖維細(xì)胞增殖、細(xì)胞骨架蛋白和CTGF的表達(dá)以及ECM的產(chǎn)生。此外，EP 阻斷 TGF-β1 刺激的 ERK1/2、p38 和 JNK 通路磷酸化。此外，TGF-β1誘導(dǎo)的纖連蛋白表達(dá)通過抑制MAPKs或EP處理而減弱。
結(jié)論：
總之，我們的研究結(jié)果表明，EP能夠抑制TGF-β1誘導(dǎo)的NRK-49F成纖維細(xì)胞活化。這一新信息提供了一系列理論證據(jù)，支持使用蟬來干預(yù)腎臟疾病，并表明EP有可能被開發(fā)為預(yù)防腎纖維化的治療劑。

反式查爾酮和槲皮素下調(diào)人類致病性皮膚癬菌紅毛癬菌中脂肪酸合酶基因表達(dá)并降低麥角甾醇含量。

脂肪酸合酶 （FAS） 是一種很有前途的抗真菌靶標(biāo)，因為它在真菌細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞之間具有明顯的結(jié)構(gòu)差異。本研究的目的是評估科學(xué)文獻(xiàn)中描述的 FAS 抑制劑（槲皮素、反式查爾酮、鞣花酸、木犀草素、高良姜素和染料木黃酮）對皮膚癬菌紅毛癬菌的抗真菌活性及其對脂肪酸和麥角甾醇合成的影響。
方法和結(jié)果：
通過微量稀釋法測定天然產(chǎn)物的抗真菌活性，測定最低抑菌濃度（MIC）。使用原生質(zhì)體再生測定法評估化合物對細(xì)胞膜的影響。通過分光光度法定量麥角甾醇含量。通過酶法評估類黃酮對 FAS 的抑制作用，以確定 IC50 值。定量RT-PCR分別用于測量參與脂肪酸和麥角甾醇生物合成的FAS1和ERG6基因在紅錐蟲暴露于所測試的類黃酮過程中的轉(zhuǎn)錄水平。 黃酮類槲皮素和反式查爾酮對紅錐蟲有效，野生型菌株（MYA3108）的MIC分別為125和7.5 μg/mL，ABC轉(zhuǎn)運蛋白突變株（ΔTruMDR2）的MIC分別為63和1.9 μg/mL。氟康唑和蔚藍(lán)素對照組野生型菌株的MIC分別為63和125 μg/mL，突變型菌株分別為30和15 μg/mL。槲皮素和反式查耳酮也降低了兩種菌株中的麥角甾醇含量，表明對脂肪酸和麥角甾醇合成的干擾導(dǎo)致了細(xì)胞膜破壞。槲皮素的MIC使再生原生質(zhì)體數(shù)量減少了30.26%（野生型菌株）和91.66%（突變型菌株）。槲皮素的一半MIC（0.5 MIC）沒有減少再生野生型真菌菌落的數(shù)量，但導(dǎo)致突變菌株原生質(zhì)體數(shù)量減少36.19%。相比之下，反式查耳酮和蔚藍(lán)素的MIC和0.5 MIC大大降低了兩種菌株的原生質(zhì)體再生。FAS1基因在槲皮素、反式查爾酮、氟康唑和蔚藍(lán)素的MIC存在下被抑制。ERG6基因在氟康唑和蔚藍(lán)素的MIC存在下被誘導(dǎo)，在反式查爾酮和槲皮素的MIC存在下被抑制。反式查爾酮和槲皮素對FAS的酶活性有抑制作用，IC50值分別為68.23和17.1 μg/mL。
結(jié)論：
反式查爾酮和槲皮素對紅錐蟲具有抗真菌活性，降低麥角甾醇水平，調(diào)節(jié)FAS1和ERG6的表達(dá)。

麥角甾醇作為活真菌生物量的量度：真菌死亡后在環(huán)境樣品中的持久性。

膜脂質(zhì)麥角甾醇幾乎只存在于真菌中，并且經(jīng)常被環(huán)境微生物學(xué)家用作活真菌生物量的指標(biāo)，基于麥角甾醇不穩(wěn)定的假設(shè)，因此在真菌菌絲死亡后迅速降解。
方法和結(jié)果：
我們研究了沒有活真菌的環(huán)境樣品中麥角甾醇的降解。在本研究使用的條件下，麥角甾醇在作為純化合物添加時以及與死真菌結(jié)合時都非常穩(wěn)定。在2個月內(nèi)，麥角甾醇的減少最多為34%，當(dāng)避免陽光照射時。與無菌對照組相比，在這段時間內(nèi)，天然細(xì)菌組合的存在并沒有增強降解。然而，光化學(xué)降解是顯著的，并導(dǎo)致麥角甾醇含量在24小時內(nèi)降低43%。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，麥角甾醇應(yīng)謹(jǐn)慎用作活真菌的生物標(biāo)志物。

V-ATP酶功能中對麥角甾醇的需求是唑類藥物抗真菌活性的基礎(chǔ)。

麥角甾醇是真菌膜的重要成分。唑類抑制麥角甾醇的生物合成，盡管其抗真菌活性的細(xì)胞基礎(chǔ)尚不清楚。我們使用多種方法來證明液泡 H（+）-ATP 酶功能對麥角甾醇的關(guān)鍵需求，已知麥角甾醇對真菌毒力至關(guān)重要。
方法和結(jié)果：
釀酒酵母麥角甾醇生物合成突變體未能酸化液泡，并表現(xiàn)出多種vma（-）表型。從液泡膜中提取麥角甾醇也使 V-ATP 酶失活，而不會破壞其亞結(jié)構(gòu)域的膜結(jié)合。在釀酒酵母和真菌病原體白色念珠菌中，氟康唑損害了液泡酸化，而伴隨的麥角甾醇喂養(yǎng)恢復(fù)了 V-ATP 酶功能和細(xì)胞生長。此外，氟康唑加劇了抗菌劑胺碘酮引發(fā)的胞質(zhì) Ca（2+） 和 H（+） 激增，并損害了純化液泡中的 Ca（2+） 封存。這些發(fā)現(xiàn)為在體外觀察到的唑類藥物和胺碘酮之間的協(xié)同作用提供了機制基礎(chǔ)。此外，我們使用念珠菌病小鼠模型展示了這種協(xié)同作用在治療全身性真菌感染方面的臨床潛力。
結(jié)論：
總之，我們證明了真菌 V-ATP 酶功能中的新調(diào)節(jié)成分、麥角甾醇在液泡離子穩(wěn)態(tài)中的新作用、真菌中唑類毒性的合理細(xì)胞機制，以及兩種抗真菌劑之間協(xié)同作用的初步體內(nèi)證據(jù)。對真菌中唑類毒性的細(xì)胞基礎(chǔ)的新見解可能會拓寬全身性真菌感染患者群體的治療方案。