蘋果酸脫氫酶—9001-64-3
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中文:蘋果酸脫氫酶
英文:MDH
CAS:9001-64-3
分子式:C9H14N4O3
純度:≥90%
中文同義詞:蘋果酸脫氫酶,蘋果酸脫氫酶;蘋果酸脫氫酶(懸浮液);
英文同義詞:MDH;Malate Dehydrogenase;
技術(shù)指標
外觀: 白色無定型凍干粉末; 蛋白純度: ≥90%; 比活性:≥1000 U/mg 酶粉; 丙酮酸激酶:≤0.5%; 乳酸脫氫酶:≤0.01%; 谷氨酸草酸酯轉(zhuǎn)氨酶: ≤0.01%
酶學性質(zhì)
來源:微生物, 蘋果酸脫氫酶; 分類EC 1.1.1.37; 分子量 35kDa(SDS-PAGE); 等電點5.61; Km值:7.8×10-5 M(Oxaloacetate); 1.2×10-4 M(NADH); 抑制劑:Hg2+; 最適pH:8.0-9.0; 最適溫度:60℃; pH穩(wěn)定性pH 4.0-9.0(25℃,16 h) 熱穩(wěn)定性:50℃ 以下穩(wěn)定(pH 7.5,30 min); 穩(wěn)定性:-25~-15℃ 靜置保存 12 個月保持90% 以上活性. 用途: 用于谷草轉(zhuǎn)氨酶試劑的研發(fā)和大量制備。
酶活定義: 單位酶活定義為在下述反應條件下每分鐘消耗 1μmol NADH 所需的酶量。
試劑準備
試劑I:100 mM pH 7.5磷酸鉀緩沖液。
試劑II:15 mM草酰乙酸(2.0 mg/mL草酰乙酸,用冷的試劑I溶解)。
試劑III:6.0 mM NADH。
試劑IV:100 mM磷酸鉀緩沖液,pH7.5,含0.2%BSA。
待測樣品:用試劑IV將酶液稀釋至0.05-0.5U/mL。
操作步驟
1.在3 mL比色皿中加入2.8 mL試劑I,0.1mL試劑II,0.1 mL試劑III,30℃預熱5 min。
2.加入50μL待測樣品,混勻。
3.在340 nm處測定30℃下,1分鐘內(nèi)吸光度的變化率。
關(guān)鍵字: 蘋果酸脫氫酶;MDH;9001-64-3;
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