腔腸素-H  Coelenterazine H

分子式：C26H21N3O2   分子量：407.46                                    

簡介：腔腸素（Coelenterazine）是自然界中資源最豐富的天然熒光素，是絕大多數(shù)海洋發(fā)光生物（超過75%）的光能貯存分子。腔腸素可作為許多熒光素酶的底物，比如海腎熒光素酶（Rluc），Gaussia分泌型熒光素酶（Gluc），以及包括水母發(fā)光蛋白（aequorin）和藪枝螅發(fā)光蛋白（Obelia）在內(nèi)的光蛋白（Photoproteins）。其發(fā)光原理是：以腔腸素為底物的熒光素酶在有分子氧的條件下，氧化腔腸素，產(chǎn)生高能量的中間產(chǎn)物，并在此過程中發(fā)射藍色光，峰值發(fā)射波長約為450~480nm。與甲蟲（或螢火蟲）熒光素/熒光素酶系統(tǒng)不同，腔腸素/熒光素酶系統(tǒng)不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于體內(nèi)生物熒光的研究。我司腔腸素-H經(jīng)過核磁結(jié)構(gòu)驗證，并在體外進行生物發(fā)光強度檢測，其發(fā)光強度高，和進口對照品牌效果相媲美。

物理性狀及指標：

激發(fā)波長（nm）：……………………437

發(fā)射波長（nm）：……………………466

儲存條件：-20℃，避光防潮密閉干燥, 保存在惰性氣體下以避免接觸空氣。

運輸條件：濕冰運輸

應(yīng)用方向：

1、腔腸素常用作基于熒光分析的報告基因檢測以及活體動物檢測的發(fā)光底物；

2、腔腸素還能在酶非依賴性的氧化體系中自發(fā)熒光，細胞和組織內(nèi)的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子能夠增強該自發(fā)光信號，因此其也可用來檢測細胞/組織內(nèi)活性氧（ROS）水平。

3、更為重要的一個功能，水母發(fā)光蛋白復(fù)合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔腸素組成。只有當鈣離子（Ca2+）與該復(fù)合物結(jié)合后，腔腸素才能被氧化生成高能量產(chǎn)物Coelenteramide，同時釋放出CO2和藍色熒光（~466 nm）。正是此Ca2+依賴性的反應(yīng)過程，使得腔腸素非常適用于監(jiān)測活細胞內(nèi)鈣離子水平。

使用方法（僅供參考）：

腔腸素溶解特性：腔腸素及所有衍生物溶于乙醇或者甲醇，切忌溶于DMSO。腔腸素的水溶性相當?shù)?，一般情況需用乙醇等配置成母液后再用水溶性緩沖液稀釋到需要的工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

腔腸素母液的配制：4mg加入2ml無水乙醇配制成5mM（相當于2mg/ml）母液，避光備用。對于所有進行熒光信號檢測的試驗建議溶液現(xiàn)用現(xiàn)配。不建議將腔腸素的乙醇母液放到-20℃或者更低溫度保存，因為其高能量的二氧環(huán)丁酮結(jié)構(gòu)即使在低溫的情況下也會瞬時降解，導(dǎo)致熒光強度明顯變?nèi)酢?/p>

腔腸素工作液的配制：可直接用PBS或者其他類型生理緩沖液稀釋?，F(xiàn)配現(xiàn)用。可直接用不含Ca2+/Mg2+的PBS緩沖液將儲存液稀釋到實驗所需的工作液濃度，4°C避光短暫存放。若是體外實驗，需要使用前室溫平衡15-20min。

【注意】

●我司產(chǎn)品為非無菌包裝，若用于細胞培養(yǎng)，請?zhí)崆白鲱A(yù)處理，除去熱原細菌，否則會導(dǎo)致染菌。

●腔腸素H的干燥粉末在密封狀態(tài)下較穩(wěn)定，可避光保存于-20℃或更低溫度。可通過在管內(nèi)充入惰性氣體（氮氣或氬氣）防止其氧化。

●當使用多孔板進行熒光值的檢測時，建議通過設(shè)置對照孔來消除由于腔腸素在工作液中不斷被氧化所帶來的誤差。

●不同種類的熒光素酶存在很大的區(qū)別。如腔腸素H可作為海腎熒光素酶的底物，但對于Gaussia熒光素酶是無效的。

●部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息，我司不保證所提供信息的權(quán)威性，以上數(shù)據(jù)僅供參考交流研究之用。