中文名:鈣黃綠素-AM
英文名:Calcein-AM
中文別名:鈣黃綠素乙酰氧基甲酯
英文別名:Calcein AM|Calcein-AM|148504-34-1|Glycine, N,N'-[[3',6'-bis(acetyloxy)-3-oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthene]-2',7'-diyl]bis(methylene)]bis[N-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-, 1,1'-bis[(acetyloxy)methyl] ester|acetyloxymethyl 2-[[2-(acetyloxy
純度:≥90% (HPLC)
貨號(hào):C273362
包裝:1mg、5mg
Cas號(hào):148504-34-1
存儲(chǔ)溫度:-20°C儲(chǔ)存,充氬
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品描述
Calcein, AM是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,它穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Calcein,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi),發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF, AM和CFDA)相比,Calcein, AM的細(xì)胞毒性很低。Calcein的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為490 nm和515 nm。
Calcein, AM僅對(duì)活細(xì)胞染色。作為核染色染料的PI不能穿過(guò)活細(xì)胞的細(xì)胞膜,它穿過(guò)死細(xì)胞膜的無(wú)序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(激發(fā):535 nm,發(fā)射:617 nm),因此PI僅對(duì)死細(xì)胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。用545 nm激發(fā),僅可觀察到死細(xì)胞。根據(jù)以上特點(diǎn),Calcein, AM和PI經(jīng)常被結(jié)合用來(lái)作為活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色。
由于不同細(xì)胞系的最佳染色條件不同,我們建議個(gè)別確定Calcein, AM和PI的合適濃度。
使用方法
(1)用DMSO制備1 mM?的Calcein, AM溶液,并用PBS將其稀釋制成1~50 μM的Calcein, AM溶液。
(2)將1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積的Calcein, AM溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中。
(3)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞15~30分鐘。
(4)用PBS或適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌細(xì)胞兩次。
(5)用490 nm激發(fā)波長(zhǎng),515 nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
a)??如果Calcein, AM很難進(jìn)入細(xì)胞,可以使用表面活性劑,如Pluronic F127。
b)?也可以用1/10濃度的Calcein, AM溶液代替培養(yǎng)基。
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