別名

E-64,n- [n-(l-3-反式羧甲-2--2-羰基)-l-亮氨酰]-胍丁胺。
注：l-3-反式羧基環(huán)氧乙烷-2-羧酸的另一個名字是l-反式環(huán)氧琥珀酸。胍丁胺是4-氨基丁基胍。,n- [n-（l-3-反式-羧基-2-羰基）-1-亮氨酰] -4-氨基丁基胍,n- [n-（l-反式環(huán)氧琥珀酸）-l-亮氨酰]-胍丁胺,反-環(huán)氧丁二?；?L-亮氨酰胺基(4-胍基)丁烷,L-反-3-羧基環(huán)氧乙烷-2-羰基)-L-亮氨酰胍基丁胺,N-(反式-環(huán)氧丁二?；?-L-亮氨酸-胍基丁基酰胺

特異性

硫醇蛋白酶抑制劑E-64可特異性的抑制木瓜蛋白酶和其他半胱氨酸蛋白酶，如組織蛋白酶B和L、菠蘿蛋白酶和絲蛋白。組織蛋白酶A和D不會被抑制。來自豬心臟的L-乳酸脫氫酶并沒有被抑制，盡管該酶含有一個官能化的巰基。

應用

E-64在蛋白和酶的分離和純化過程中可用于抑制木瓜蛋白酶和其他半胱氨酸蛋白酶，如組織蛋白酶B和L、菠蘿蛋白酶和絲蛋白。
它已被用于親和色譜來純化血紅蛋白受體。
E-64對巰基蛋白酶的抑制似乎在SH組分之間具有非競爭性。抑制作用也是不可逆的，并在凝膠過濾（Sephadex色譜柱）或木瓜蛋白酶與E-64孵育后的透析后發(fā)生改變。酶和抑制劑是以等摩爾的比例結合的。 E-64是親和純化半胱氨酸蛋白酶的有效配體。當與硫醇化親和基質偶聯(lián)時，結合將成為可逆的，但保留了特異性。

生化/生理作用

E-64是一種不可逆的、強效的、高選擇性半胱氨酸蛋白酶抑制劑。E-64不與非蛋白酶的功能性硫醇基團反應，如 L-乳酸脫氫酶或肌酸激酶。與亮抑酶肽和抗蛋白酶肽等其他半胱氨酸蛋白酶抑制劑不同，E-64不會抑制絲氨酸蛋白酶（胰蛋白酶除外）。E-64的反式環(huán)氧琥珀?；ɑ钚圆糠郑┎豢赡娴嘏c許多半胱氨酸蛋白酶的活性巰基結合，如木瓜蛋白酶、獼猴桃酶和組織蛋白酶B、H和L，從而形成硫醚鍵。 E-64是一種非常有用的半胱氨酸蛋白酶抑制劑，具有特異性抑制作用，在細胞和組織中具有滲透性，毒性低，可用于 體內 研究。

制備說明

工作濃度：0.5至1.0 μg/ml （1.4至28.0 μM）
工作溶液：在乙醇和水的1:1 (v/v)混合液中可溶解至20 mg/ml（儲備液）（渦旋或在水?。?0°C）中略微加熱可能有助于溶解）。也可溶于中性水/甲醇溶液、水、甲醇、乙酸、吡啶和DMSO。微溶于乙醇和丙醇。不溶于丙酮、氯仿、乙醚和苯。
儲存條件（工作溶液）：-15至-25 °C
溶液在分裝后可穩(wěn)定保存在-15至-25 °C中最長一個月。 E-64可溶于水。可配制成20 mg/ml的水溶液（可能需要加熱）。 建議儲備溶液是1 mM水溶液。用作蛋白酶抑制劑的有效濃度為1至10 μM。 水溶液儲備溶液可在-20°C穩(wěn)定保存數(shù)月。稀釋液可在中性pH體系中穩(wěn)定保存數(shù)天。 E-64在pH 2-10體系中穩(wěn)定，但在氨水或HCl體系中不穩(wěn)定。 E-64也溶于DMSO，可使用無水DMSO制備10 mM溶液并儲存在-20℃。使用培養(yǎng)基進行后續(xù)稀釋。將E-64溶解在0.9％氯化鈉溶液中或溶解在最少量的飽和碳酸氫鈉溶液中并用0.9％氯化鈉稀釋（用乙酸調節(jié)pH至7.0），可制備注射液。

重懸

在乙醇和水的1:1 (v/v)混合液中可溶解至20 mg/ml。溶液分裝后在-15至-25℃下可穩(wěn)定保存一個月。