人多能干細胞消化液
一、產(chǎn)品基本信息
產(chǎn)品名稱 | Applied Cell?人多能干細胞消化液 |
貨 號 | AC-1001008 |
規(guī) 格 | 100mL |
運輸保存條件 | 2-8℃，冰袋運輸 |
使用范圍 | 人多能干細胞(ES/iPS)消化后傳代、凍存 |
保質(zhì)期 | 12 個月 |
二、產(chǎn)品簡介
人多能干細胞消化液是埃澤思生物科技有限公司（Applied Cell?）自主研發(fā)的一款不含蛋白消化酶、專業(yè)應用于人多能干細胞消化傳代的產(chǎn)品。本產(chǎn)品為溫和高效型消化液，限度減少對干細胞消化損傷，傳代存活率高，且消化時間 3-5min 即可，和傳統(tǒng)細胞傳代方法相比，簡化細胞傳代過程。本產(chǎn)品生產(chǎn)過程遵循 ISO9001 體系,并符合 GMP 指導原則。
三、產(chǎn)品特性
l 溫和高效，傳代存活率高。
l 簡化細胞傳代過程，省去挑克隆的操作。
四、相關產(chǎn)品
人 多 能 干 細 胞 培 養(yǎng) 基 （Applied Cell?: Cat. no.AC-1001000） Advance 人多能干細胞培養(yǎng)基（Applied Cell?: Cat. no.AC-1001001） 人多能干細胞分化培養(yǎng)基（Applied Cell?: Cat. no.AC-1001002）
即 用 型 基 質(zhì) 膠 （Applied Cell?: Cat. no.AC-1001007） ES/iPS 細胞凍存液（Applied Cell?: Cat. no.AC-1001012）
五、操作方法（此次操作以 6 孔板為例）
1) 清洗：準備預傳代細胞，貼邊緩慢加入預熱 2 mL PBS 緩沖液并輕輕晃動，然后沿培養(yǎng)皿邊緣吸去 PBS 緩沖液。
2) 消化：在 6 孔板中加入 2 mL 消化液使之覆蓋皿底，并置于 CO2 培養(yǎng)箱中孵育 2~5 min；
注意：細胞密度不同，消化時間略有調(diào)整，在顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣以及克隆內(nèi)部細胞間出
現(xiàn)間隙，即刻吸掉消化液停止消化。
3) 吹打：吸掉人多能干細胞消化液后，立刻加入平衡好的 2mL 干細胞培養(yǎng)基，用移液槍呈扇形吹打 6 孔板底，吹吸次數(shù)保持在 3~5 次，使皿底貼附的干細胞集落脫落，輕柔緩慢吹吸混勻，制成干細胞懸液，并將其轉(zhuǎn)移到 15mL 離心管中；
注意：吹打細胞要輕柔，吹打次數(shù)在 3~5 次為宜，盡量避免形成單細胞。如有少量細胞無法從皿底脫落，屬于正?，F(xiàn)象。如有大量細胞無法從皿底脫落，需延長消化時間。
4) 干細胞消化后，可以繼續(xù)進行傳代接種，也可以將干細胞進行凍存，步驟如下：
接種：1200 rpm/min 離心 3 min，棄上清，用室溫平衡好的干細胞培養(yǎng)基緩吹打重懸細胞 5-10 次， 并轉(zhuǎn)移至包被好的培養(yǎng)板中，每孔 2ml 培養(yǎng)基。接種后顯微鏡下觀察干細胞密度以及細胞團塊大小， 一般 4 個細胞以上的團塊較合格，水平十字輕輕晃動 6 孔板，使細胞分布均勻。并置于 CO2 恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，第 2 天觀察細胞貼壁情況，每 24h 換液一次。
凍存：1200 rpm/min 離心 3 min，棄上清，加入 2mL ES/iPS 細胞凍存液（AC-1001012），重懸3~5 次后，將其加入到 2mL 凍存管中（注意：凍存液即用即拿，及時放回 4℃冰箱。）。在凍存管上標記凍存細胞種類、時間、操作者及細胞批次，凍存管置于-80℃冰箱過夜，24h 后將其轉(zhuǎn)至于液氮中進行長期保存。
六、質(zhì)量控制
關鍵字： 人多能干細胞消化液; 消化液;干細胞消化液;細胞消化液;
埃澤思生物總部位于上海，公司取名Applied Cell(應用細胞)，是一家致力于為細胞治aize 療、再生埃澤思生物總部位于上海，公司取名AppliedCell(應用細胞)，是一家致力于為細胞治療、再生醫(yī)學提供核心原料，以及研發(fā)服務（CRO ）和生物藥委托開發(fā)生產(chǎn)服務（CDMO）的生物科技公司。目前公司產(chǎn)品已經(jīng)涵蓋干細胞、免疫細胞治療全流程試劑原料。其中核心產(chǎn)品已經(jīng)完成美國FDADMF備案以及國家藥品評審中心（CDE）藥物原輔料備案，是國內(nèi)資質(zhì)最為齊全的細胞治療原料供應商之一。目前，公司已與國內(nèi)6家細胞治療企業(yè)進行細胞治療一類新藥聯(lián)合申報，一項日本一類新藥聯(lián)合申報。