人多能干細(xì)胞消化液
一、產(chǎn)品基本信息
產(chǎn)品名稱 | Applied Cell?人多能干細(xì)胞消化液 |
貨 號(hào) | AC-1001008 |
規(guī) 格 | 100mL |
運(yùn)輸保存條件 | 2-8℃,冰袋運(yùn)輸 |
使用范圍 | 人多能干細(xì)胞(ES/iPS)消化后傳代、凍存 |
保質(zhì)期 | 12 個(gè)月 |
二、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
人多能干細(xì)胞消化液是埃澤思生物科技有限公司(Applied Cell?)自主研發(fā)的一款不含蛋白消化酶、專業(yè)應(yīng)用于人多能干細(xì)胞消化傳代的產(chǎn)品。本產(chǎn)品為溫和高效型消化液,限度減少對(duì)干細(xì)胞消化損傷,傳代存活率高,且消化時(shí)間 3-5min 即可,和傳統(tǒng)細(xì)胞傳代方法相比,簡(jiǎn)化細(xì)胞傳代過(guò)程。本產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程遵循 ISO9001 體系,并符合 GMP 指導(dǎo)原則。
三、產(chǎn)品特性
l 溫和高效,傳代存活率高。
l 簡(jiǎn)化細(xì)胞傳代過(guò)程,省去挑克隆的操作。
四、相關(guān)產(chǎn)品
人 多 能 干 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 基 (Applied Cell?: Cat. no.AC-1001000) Advance 人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基(Applied Cell?: Cat. no.AC-1001001) 人多能干細(xì)胞分化培養(yǎng)基(Applied Cell?: Cat. no.AC-1001002)
即 用 型 基 質(zhì) 膠 (Applied Cell?: Cat. no.AC-1001007) ES/iPS 細(xì)胞凍存液(Applied Cell?: Cat. no.AC-1001012)
五、操作方法(此次操作以 6 孔板為例)
1) 清洗:準(zhǔn)備預(yù)傳代細(xì)胞,貼邊緩慢加入預(yù)熱 2 mL PBS 緩沖液并輕輕晃動(dòng),然后沿培養(yǎng)皿邊緣吸去 PBS 緩沖液。
2) 消化:在 6 孔板中加入 2 mL 消化液使之覆蓋皿底,并置于 CO2 培養(yǎng)箱中孵育 2~5 min;
注意:細(xì)胞密度不同,消化時(shí)間略有調(diào)整,在顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣以及克隆內(nèi)部細(xì)胞間出
現(xiàn)間隙,即刻吸掉消化液停止消化。
3) 吹打:吸掉人多能干細(xì)胞消化液后,立刻加入平衡好的 2mL 干細(xì)胞培養(yǎng)基,用移液槍呈扇形吹打 6 孔板底,吹吸次數(shù)保持在 3~5 次,使皿底貼附的干細(xì)胞集落脫落,輕柔緩慢吹吸混勻,制成干細(xì)胞懸液,并將其轉(zhuǎn)移到 15mL 離心管中;
注意:吹打細(xì)胞要輕柔,吹打次數(shù)在 3~5 次為宜,盡量避免形成單細(xì)胞。如有少量細(xì)胞無(wú)法從皿底脫落,屬于正常現(xiàn)象。如有大量細(xì)胞無(wú)法從皿底脫落,需延長(zhǎng)消化時(shí)間。
4) 干細(xì)胞消化后,可以繼續(xù)進(jìn)行傳代接種,也可以將干細(xì)胞進(jìn)行凍存,步驟如下:
接種:1200 rpm/min 離心 3 min,棄上清,用室溫平衡好的干細(xì)胞培養(yǎng)基緩吹打重懸細(xì)胞 5-10 次, 并轉(zhuǎn)移至包被好的培養(yǎng)板中,每孔 2ml 培養(yǎng)基。接種后顯微鏡下觀察干細(xì)胞密度以及細(xì)胞團(tuán)塊大小, 一般 4 個(gè)細(xì)胞以上的團(tuán)塊較合格,水平十字輕輕晃動(dòng) 6 孔板,使細(xì)胞分布均勻。并置于 CO2 恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng),第 2 天觀察細(xì)胞貼壁情況,每 24h 換液一次。
凍存:1200 rpm/min 離心 3 min,棄上清,加入 2mL ES/iPS 細(xì)胞凍存液(AC-1001012),重懸3~5 次后,將其加入到 2mL 凍存管中(注意:凍存液即用即拿,及時(shí)放回 4℃冰箱。)。在凍存管上標(biāo)記凍存細(xì)胞種類、時(shí)間、操作者及細(xì)胞批次,凍存管置于-80℃冰箱過(guò)夜,24h 后將其轉(zhuǎn)至于液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。
六、質(zhì)量控制
關(guān)鍵字: 人多能干細(xì)胞消化液; 消化液;干細(xì)胞消化液;細(xì)胞消化液;
埃澤思生物總部位于上海,公司取名Applied Cell(應(yīng)用細(xì)胞),是一家致力于為細(xì)胞治aize 療、再生埃澤思生物總部位于上海,公司取名AppliedCell(應(yīng)用細(xì)胞),是一家致力于為細(xì)胞治療、再生醫(yī)學(xué)提供核心原料,以及研發(fā)服務(wù)(CRO )和生物藥委托開(kāi)發(fā)生產(chǎn)服務(wù)(CDMO)的生物科技公司。目前公司產(chǎn)品已經(jīng)涵蓋干細(xì)胞、免疫細(xì)胞治療全流程試劑原料。其中核心產(chǎn)品已經(jīng)完成美國(guó)FDADMF備案以及國(guó)家藥品評(píng)審中心(CDE)藥物原輔料備案,是國(guó)內(nèi)資質(zhì)最為齊全的細(xì)胞治療原料供應(yīng)商之一。目前,公司已與國(guó)內(nèi)6家細(xì)胞治療企業(yè)進(jìn)行細(xì)胞治療一類新藥聯(lián)合申報(bào),一項(xiàng)日本一類新藥聯(lián)合申報(bào)。