人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化試劑盒
hMSC Osteogenesis Differentiation Kit
人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化試劑盒
一、產(chǎn)品基本信息
產(chǎn)品名稱 | Applied Cell?人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化試劑盒 |
貨 號(hào) | AC-1001027 |
規(guī) 格 | 1kit |
保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 2-8℃，添加劑-20--80℃保存； 混合后 2-8℃保存，2-3 周內(nèi)使用完畢 |
使用范圍 | 人間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化成骨 |
保質(zhì)期 | 1 年 |
二、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化試劑盒是埃澤思生物（Applied Cell?）自主研發(fā)的一款用于人間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成骨分化的產(chǎn)品，可用于骨髓、臍帶、脂肪等組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞的誘導(dǎo)成骨分化。
三、產(chǎn)品特性
l 誘導(dǎo)分化程序簡(jiǎn)單便捷。
l 誘導(dǎo)成骨細(xì)胞效率高。
四、產(chǎn)品內(nèi)容
五、相關(guān)材料
? Xeno-Free 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基（Applied Cell?:AC-1001003）
? 人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化試劑盒（Applied Cell?:AC-1001027）
? 成骨檢測(cè)染液（Applied Cell?:AC-1001021）
? 細(xì)胞消化液（Applied Cell?:AC-1001024）
? 磷酸鹽緩沖液(1×) （Applied Cell?: Cat.AC-1001037）
五、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化培養(yǎng)基配制：
1. 2-8℃解凍人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化添加劑，輕晃搖勻；
2. 隨后將添加劑加入到人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化基礎(chǔ)培養(yǎng)基中（添加劑 10mL 與 90mL 基礎(chǔ)培養(yǎng)基徹底混合）混勻，即為人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化培養(yǎng)基。人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化培養(yǎng)基可在 2-8℃穩(wěn)定儲(chǔ)存 2-3 周。
注意：人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化添加劑只能在 2-8℃解凍，待添加劑加入到培養(yǎng)基以后，請(qǐng)用培養(yǎng)基潤(rùn)洗添加劑試管 1-2 次，因添加劑量較少可防止添加劑粘附在試管壁上造成損失。
六、實(shí)驗(yàn)操作
1. 誘導(dǎo)成骨（以 6 孔板為例）
1.1. 使用細(xì)胞細(xì)胞包被液包被細(xì)胞培養(yǎng)板，將傳代或復(fù)蘇凍存的人間充質(zhì)干細(xì)胞接種到 6 孔板上，密度為 2×105 -3×105 cells/cm2 或 2×105 -3×105 cells/孔，置于 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80%-90%時(shí)，小心的將孔內(nèi)人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基吸掉，向 6 孔板中加入 2 mL 人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化培養(yǎng)基,以此記為第 0 天；
注意：成骨分化容易使細(xì)胞卷起，，成骨分化時(shí)應(yīng)使用包被液包被細(xì)胞培養(yǎng)板。
1.2. 每隔 1-2 天更換新鮮的人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化培養(yǎng)基；
注意：為防止成骨細(xì)胞脫落，建議成骨過(guò)程中出現(xiàn)大量鈣結(jié)節(jié)之后，換液形式變?yōu)槊刻煲淮伟肓繐Q液。
1.3. 誘導(dǎo) 14-21 天期間，視細(xì)胞的形態(tài)變化及生長(zhǎng)情況（如圖 1 所示），可用成骨檢測(cè)染液（Applied Cell:AC-1001021）進(jìn)行染色。
人間充質(zhì)干細(xì)胞在誘導(dǎo)成骨分化 2 天(A)、6 天（B）、14 天(C)的細(xì)胞照片，可以觀察到成片的鈣結(jié)節(jié)（100×）
2. 成骨檢測(cè)染液染色
2.1. 誘導(dǎo)成骨分化結(jié)束后，吸掉 6 孔板中的成骨分化培養(yǎng)基，用 PBS 沖洗 1-2 次。每孔加入 1 mL 細(xì)胞固定液，固定 10~30 min；
2.2. 吸掉細(xì)胞固定液，PBS 沖洗 2 次。每孔加入 2 mL 成骨檢測(cè)染液，染色 3-5 min；
2.3. 吸掉成骨檢測(cè)染液，用 PBS 沖洗 2-3 次；
2.4. 將培養(yǎng)板置于顯微鏡下觀察成骨染色效果（如圖 2 所示）。
人間充質(zhì)干細(xì)胞在誘導(dǎo)成骨后成骨檢測(cè)染液染色前（D）和染色后(E)的照片（200×）
關(guān)鍵字： 人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化試劑盒;干細(xì)胞成骨分化試劑盒;埃澤思干細(xì)胞成骨分化試劑盒;間充質(zhì)干細(xì)胞的誘導(dǎo)成骨分化;
埃澤思生物總部位于上海，公司取名Applied Cell(應(yīng)用細(xì)胞)，是一家致力于為細(xì)胞治aize 療、再生埃澤思生物總部位于上海，公司取名AppliedCell(應(yīng)用細(xì)胞)，是一家致力于為細(xì)胞治療、再生醫(yī)學(xué)提供核心原料，以及研發(fā)服務(wù)（CRO ）和生物藥委托開(kāi)發(fā)生產(chǎn)服務(wù)（CDMO）的生物科技公司。目前公司產(chǎn)品已經(jīng)涵蓋干細(xì)胞、免疫細(xì)胞治療全流程試劑原料。其中核心產(chǎn)品已經(jīng)完成美國(guó)FDADMF備案以及國(guó)家藥品評(píng)審中心（CDE）藥物原輔料備案，是國(guó)內(nèi)資質(zhì)最為齊全的細(xì)胞治療原料供應(yīng)商之一。目前，公司已與國(guó)內(nèi)6家細(xì)胞治療企業(yè)進(jìn)行細(xì)胞治療一類新藥聯(lián)合申報(bào)，一項(xiàng)日本一類新藥聯(lián)合申報(bào)。