魯米諾是一種化學熒光分子,在過氧化氫分子存在的條件下可以轉變成激發(fā)態(tài)氨基鄰苯二甲酸,后者發(fā)出較強的熒光。過氧化氫是許多生物氧化反應的產(chǎn)物,因此很容易通過引入魯米諾將這些生物氧化反應與光檢測聯(lián)系起來。例如用葡萄糖氧化酶/過氧化氫酶探頭能夠檢測樣品中的過氧化氫或葡萄糖的濃度,響應時間僅0.5s(動態(tài)法)。
將化學發(fā)光物質與免疫學反應結合起來,用光反應表示被測的免疫成分濃度,稱為化學發(fā)光免疫分析技術(chemiluminescenceimmuneassay,CLIA)。1976年Shmeder提出了化學發(fā)光免疫分析,以魯米諾-H202及衍生物ABEI為檢測反應顯示系統(tǒng),目前魯米諾(luminol)及其衍生物已經(jīng)是化學發(fā)光免疫測定應用中最常用的標記物,它們在堿性條件下,通過微過氧化物酶(microperoxidase)催化,可釋放出大量光子,魯米諾可用于HRP標記抗體的WesternBlot和HRP標記探針的核酸雜交檢測,也用于現(xiàn)代刑偵血跡檢測?;瘜W發(fā)光物質能作為化學發(fā)光標記物的化合物須具備下列條件:發(fā)光的量子產(chǎn)率高;其理化特性與所研究的體系相匹配;其發(fā)光反應是發(fā)光物質氧化反應的結果;在所用的濃度范圍內對生物體無毒。常用的幾類化學發(fā)光試劑有:吖啶酯(acridiniumester),是一種用途廣泛的化學發(fā)光示蹤物,它是一個三環(huán)的有機化合物,容易氧化,且氧化反應無需催化劑,在430nm處釋放出光子;魯米諾和異魯米諾及其衍生物是最成熟的化學發(fā)光劑,早在1964年While就作了化學發(fā)光的研究報道,魯米諾、異魯米諾及其衍生物用于化學發(fā)光免疫測定已取得較理想的效果。
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