ActSep? CD3/CD28激活磁珠（ActSep?CD3/CD28 Activation Magnetic Beads），GMP級

產(chǎn)品貨號：GMP-TL601

? 產(chǎn)品描述（Description）

 ActSep?CD3/CD28激活磁珠提供了一種不需要抗原呈遞細(xì)胞就能激活和擴(kuò)增T細(xì)胞的簡單方法。通過在磁珠上偶聯(lián)抗CD3和抗CD28單克隆抗體，提供T細(xì)胞激活和擴(kuò)增需要的初級和協(xié)同刺激信號，實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞的激活和擴(kuò)增。

? 產(chǎn)品特點(diǎn)（Advantages）

1、4.5um磁珠與細(xì)胞大小匹配

2、T細(xì)胞活化無需滋養(yǎng)層細(xì)胞

3、產(chǎn)品表現(xiàn)穩(wěn)定，對細(xì)胞損傷小

4、9-14天可擴(kuò)增100倍以上

5、ISO13485醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系認(rèn)證

? 濃度（Concentration）

2×108beads/ml

? 反應(yīng)種屬（Reaction Species）

人

?內(nèi)毒素（Endotoxin）

<2EU/mL

? 適用范圍

T 淋巴細(xì)胞

? 保存溫度（Storage Temperature）

2~8℃

? 使用方法（Usage method）

一、ActSep?CD3/CD28激活磁珠的清洗：

1.1 重懸磁珠（渦旋超過30s，或者顛倒混勻5min）；

1.2 按實(shí)際用量需求，將確定體積的磁珠轉(zhuǎn)移至離心管中；

1.3 加入等體積的含1% HSA的PBS緩沖液，若磁珠體積小于1 mL，則加 l mL含1% HSA的PBS緩沖液，進(jìn)行重懸潤洗，吹打或渦旋；

1.4將上述裝有重懸磁珠的離心管放在磁力架（磁珠專用）上，靜置1min，棄去上清，注意不要吸取到磁珠。

1.5于上述離心管中加入與1.2等體積的含有200 IU/mL rhIL-2的完全培養(yǎng)基重懸磁珠備用。

二、磁珠激活和擴(kuò)增 T細(xì)胞

2.1 用含有200 IU/mL rhIL-2的完全培養(yǎng)基調(diào)整T細(xì)胞密度至1~1.5×106cells/mL，將調(diào)整好密度的細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)容器中。

2.2按照磁珠和T細(xì)胞數(shù)量比例（推薦比例范圍為1:1 ~ 3:1。在實(shí)際應(yīng)用中，客戶可根據(jù)實(shí)際情況摸索調(diào)整），將上述1.5重懸的磁珠按比例加入鋪好細(xì)胞的培養(yǎng)容器中。

2.3將上述培養(yǎng)容器置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

2.4根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，可在培養(yǎng)階段對活化的T細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步分析（取樣后，去除磁珠并對細(xì)胞進(jìn)行流式檢測）。

2.5逐日觀察細(xì)胞狀態(tài)，建議每周至少兩次對細(xì)胞進(jìn)行取樣計(jì)數(shù)，并定期補(bǔ)液。

2.6當(dāng)細(xì)胞密度超過2.5×106cells/mL或培養(yǎng)基變黃時(shí)，調(diào)整細(xì)胞密度至0.5~1×106cells/mL。將細(xì)胞培養(yǎng)至適宜時(shí)長后（一般12~14天）即可收獲細(xì)胞。

2.7若培養(yǎng)時(shí)間需延長，可考慮通過對細(xì)胞再刺激培養(yǎng)，具體如下：

2.7.1重新刺激前，將細(xì)胞轉(zhuǎn)至干凈的無菌離心管中，用磁力架（磁珠專用）去除使用過的磁珠。

2.7.2將含有細(xì)胞的懸液轉(zhuǎn)至新的離心管中，用含有200 IU/mL rhIL-2的完全培養(yǎng)基調(diào)整T細(xì)胞密度至0.5~1×106cells/mL。

2.7.3重復(fù)磁珠清洗、磁珠激活和擴(kuò)增T細(xì)胞的步驟。細(xì)胞培養(yǎng)至適宜天數(shù)后，可去除磁珠收獲細(xì)胞。

注意事項(xiàng)：

1.細(xì)胞擴(kuò)增后需定期輕輕吹打培養(yǎng)容器中的細(xì)胞懸液，以便充分分散磁珠和細(xì)胞。

2.培養(yǎng)過程中，可以每2~3天進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞計(jì)數(shù)前均需去磁，去磁過程：將細(xì)胞培養(yǎng)器中的細(xì)胞混懸均勻后取樣至離心管中，將其放在磁力架（磁珠專用）上，靜置1min，取上清至新的離心管。

3.培養(yǎng)過程中可通過流式細(xì)胞術(shù)對T細(xì)胞的表型、活化狀態(tài)進(jìn)行檢測。

? 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（Experimental Data）

? 參考文獻(xiàn)

Donor-Derived CD7 Chimeric Antigen Receptor T Cells for T-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia: First-in-Human, Phase I Trial

影響因子：44.54

 ? 注意事項(xiàng)

1.細(xì)胞擴(kuò)增后需定期輕輕吹打培養(yǎng)容器中的細(xì)胞懸液，以便充分分散磁珠和細(xì)胞。

2.培養(yǎng)過程中，可以每2~3天進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞計(jì)數(shù)前均需去磁，去磁過程：將細(xì)胞培養(yǎng)器中的細(xì)胞混懸均勻后取樣至離心管中，將其放在磁力架（磁珠專用）上，靜置1min，取上清至新的離心管。

3.培養(yǎng)過程中可通過流式細(xì)胞術(shù)對T細(xì)胞的表型、活化狀態(tài)進(jìn)行檢測。

   注意：For research and manufacturing use.