產(chǎn)品簡(jiǎn)介
SYTO 9綠色熒光核酸染料(SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain),是一款優(yōu)秀的綠色熒光細(xì)胞核和染色體復(fù)染劑,能滲透進(jìn)入原核和真核細(xì)胞膜。SYTO 9高親和結(jié)合DNA(以及RNA),一旦結(jié)合后呈現(xiàn)明顯增強(qiáng)的熒光信號(hào),激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別是483nm和503nm。SYTO 9極其適合用作細(xì)菌實(shí)驗(yàn)的核復(fù)染劑,因其對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌的活細(xì)胞和死細(xì)胞都能染色。SYTO 9常常與碘化丙啶(PI)聯(lián)合使用,用于活/死細(xì)菌染色。
本品以DMSO儲(chǔ)存液形式提供,濃度為5mM。只需用合適的生理緩沖液稀釋到工作濃度進(jìn)行簡(jiǎn)單孵育即可。適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性菌。
若需做雙染,可直接購(gòu)買(mǎi)我司的SYTO 9/PI Live/Dead Bacterial Double Stain Kit 活細(xì)菌/死細(xì)菌雙染試劑盒(貨號(hào)#FS4005-40T)。
產(chǎn)品特性
1) 同義名:SYTO 9 Green dye;SYTO 9綠色熒光染料;
2) 外觀:橙色溶液
3) 熒光特征:EX/Em=485/498nm(與DNA結(jié)合);EX/Em=486/501nm(與RNA結(jié)合)
熒光特征:EX/Em=485/498nm(與DNA結(jié)合);EX/Em=486/501nm(與RNA結(jié)合)
圖1. SYTOX 9與核酸結(jié)合的光譜特征。A)與DNA結(jié)合的吸收光譜;B)與RNA結(jié)合的吸收光譜;C)與DNA或RNA結(jié)合后的熒光發(fā)射光譜。
4) 滲透性:細(xì)胞通透性
染色流程
基于實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)和發(fā)表方法,建議使用廣譜的染色濃度來(lái)開(kāi)展使用,并且根據(jù)自身的細(xì)胞類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)體系來(lái)優(yōu)化摸索出的工作濃度(見(jiàn)表2)。
使用塑料管來(lái)稀釋SYTO 9染料,由于稀釋后的染料會(huì)粘附到玻璃上??偟膩?lái)說(shuō),用不含磷酸鹽的緩沖液來(lái)染色能得到的結(jié)果。塑料或玻璃器皿上殘留的去污劑也有可能影響許多細(xì)胞或有機(jī)體的真實(shí)染色,導(dǎo)致在含或不含細(xì)胞的溶液中都能看到發(fā)明亮熒光的材料。確保用溫和去污劑來(lái)清洗玻璃器皿,用熱自來(lái)水完全沖洗干凈,最后用去離子水清洗數(shù)次。
表2. SYTOX 9染色不同細(xì)胞的建議工作濃度 |
細(xì)胞類(lèi)型 | SYTOX 9濃度 | 孵育條件 |
細(xì)菌細(xì)胞 | 50 nM-20 μM | 渦旋混勻,之后孵育1-30 min |
真核細(xì)胞 | 10 nM-5 μM | 孵育10-120 min |
微陣列 (Microarrays) | 50 nM in TE buffer | 孵育5 min,清洗之后晾干 |
①離心收集細(xì)胞,用生理鹽溶液或水重懸細(xì)胞。貼壁細(xì)胞(比如:哺乳動(dòng)物細(xì)胞)可能在蓋玻片上原位染色。使用表2內(nèi)建議的工作濃度進(jìn)行染色。初次實(shí)驗(yàn),建議在建議濃度范圍內(nèi)做多個(gè)染料濃度,以確定能得到染色的工作濃度。需要注意:生長(zhǎng)培養(yǎng)基、細(xì)胞密度、是否存在其它細(xì)胞、和其它因素都可能影響染色。
②染色的真核細(xì)胞通常顯示出彌散的細(xì)胞漿染色和細(xì)胞核染色,特別是經(jīng)??吹矫髁恋暮藘?nèi)小體染色。由于此染料具細(xì)胞膜滲透性,且中性pH下帶凈正電荷,也有可能染線(xiàn)粒體?;罱湍妇鷥?nèi)主要是線(xiàn)粒體染色。
相關(guān)產(chǎn)品
貨號(hào) | 名稱(chēng) | 規(guī)格 |
FS4000-20UL | SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO) | 20μl |
FS4001-50UL | SYTO X Green Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO) | 50μl |
FS1202-10MG | Propidium Iodide 碘化丙啶(粉末) | 10mg |
FS1202-1ML | Propidium Iodide 碘化丙啶(1mg/ml溶液) | 1ml |
FS1204-10MG | DAPI 細(xì)胞核探針 | 10mg |
FS1209-5MG | Ethidium Monoazide Bromide (EMA) 疊氮溴化乙錠 | 5mg |
FS4005-40T | SYTO 9/PI Live/Dead Bacterial Double Stain Kit 活細(xì)菌/死細(xì)菌雙染試劑盒 | 40T
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關(guān)鍵字: SYTO 9 Green;Propidium Iodide ;DAPI;SYTO X;
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