本品由牛膽粉、膽酸、豬去氧膽酸、?;撬帷⒛懠t素、膽固 醇、微量元素等加工制成。 【性狀】本品為黃色疏松粉末。味苦,微甘。 【鑒別】(1)取〔含量測定〕膽紅素項下的續(xù)濾液,照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定,在453nm波長處有吸收。 ?。?)取本品0.1g,置10ml量瓶中,加甲醇適量,超聲處理 5分鐘,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,靜置,取上清液作為供試品溶液。另取膽酸對照品、豬去氧膽酸對照品,加甲醇制成每 lml各含1mg的混合溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗,吸取供試品溶液4μl、對照品溶液2μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇 (20∶25∶2∶3)上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。 ?。?)取牛膽粉對照藥材10mg,加甲醇適量,超聲處理使充 分溶解,再加甲醇至10ml,搖勻,靜置,取上清液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗,吸取〔鑒別〕(2)項 下的供試品溶液和上述對照藥材溶液各8μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-冰醋酸-水(7.5∶10∶0.3)為展開劑, 展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。 ?。?)取本品50mg,加水5ml,超聲處理5分鐘,加甲醇至 10ml,靜置,取上清液作為供試品溶液。另取?;撬釋φ掌罚蛹状贾瞥擅?ml含0. 5mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗,吸取上述兩種溶液各2μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正丁醇-乙醇-冰醋酸-水(4∶1∶2∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,在105℃加熱10分鐘,噴以1 %茚三酮乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。 【檢查】水分 不得過5.0%(通則0832第二法)。 【含量測定】膽酸 對照品溶液的制備 取膽酸對照品 12.5mg,精密稱定,置25ml量瓶中,加60%冰醋酸溶液使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得(每1ml中含膽酸0.5mg)。 標準曲線的制備 精密量取對照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、lml,分別置具塞試管中,各管加入60%冰醋酸溶液稀釋成1.0ml,再分別加新制的糠醛溶液(1→100) 1.0ml,搖勻,在冰浴中放置5分鐘,精密加入硫酸溶液(取硫酸50ml與水65ml混合)13ml,混勻,在70℃水浴中加熱10分鐘,迅速移至冰浴中,放置2分鐘,以相應的試劑為空白,照紫外-可見分光光度法(通則0401),在605nm波長處測定吸光度,以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線。 測定法 取本品約0.1g,精密稱定,置50ml量瓶中,加 60%冰醋酸溶液適量,超聲處理5分鐘,用60%冰醋酸溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過,棄去初濾液,精密量取續(xù)濾液各1ml,分別置甲、乙兩個具塞試管中,于甲管中加新制的糠醛溶液1ml,乙管中加水1ml作空白,照標準曲線制備項下的方法,自“在冰浴中放置5分鐘”起,依法測定吸光度,從標準曲線上讀出供試品溶液中含膽酸的重量,計算,即得。 本品按干燥品計算,含膽酸(C24H40O5)不得少于13.0%。 膽紅素 對照品溶液的制備 取膽紅素對照品10mg,精密稱定,置100ml棕色量瓶中,加三氯甲烷80ml,超聲處理使充分溶解,加三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻。精密量取10ml,置 50ml棕色量瓶中,用三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,即得(每 1ml中含膽紅素20μg)。 標準曲線的制備 精密量取對照品溶液4ml、5ml、 6ml、7ml、8ml,分別置25ml棕色量瓶中,用三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,照紫外-可見分光光度法(通則0401),在 453nm處測定吸光度,以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線。 測定法 取本品約80mg,精密稱定,置100ml棕色量瓶中,加三氯甲烷80ml超聲處理使充分溶解,用三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,濾過,棄去初濾液,取續(xù)濾液,在453nm波長處測定吸光度,從標準曲線上讀出供試品溶液中含膽紅素的重 量,計算,即得。
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