艾普蒂生物多年致力于重組蛋白表達與制備研究。我們的科學家擁有豐富的酵母(Yeast)蛋白重組表達、發(fā)酵和純化經(jīng)驗,能夠快速為不同客戶定制蛋白酵母表達策略。
蛋白酵母表達系統(tǒng)兼具部分原核蛋白表達特征(培養(yǎng)條件簡單、生長速度快、表達水平高、操作簡便)和部分真核蛋白表達特征(蛋白翻譯后能進行正確加工、修飾,合理的空間折疊)。重組蛋白酵母表達系統(tǒng)的優(yōu)勢主要表現(xiàn)在以下幾個方面:重組蛋白既可以分泌形式又可以非分泌形式在酵母系統(tǒng)中表達,且能高水平表達,達到5g/L;外源蛋白基因可以以整合的方式插入到酵母染色體上,隨染色體復制而不會丟失;酵母具有真核生物的亞細胞結構,具有糖基化、脂肪?;?、蛋白磷酸化等翻譯后修飾加工功能,適合活性蛋白表達;容易實現(xiàn)超高密度發(fā)酵,艾普蒂生物能同時為客戶提供多種規(guī)格的蛋白酵母發(fā)酵規(guī)模,如500L發(fā)酵罐,配合我們的蛋白純化平臺,能夠在較短周期內(nèi)獲得高質(zhì)量的重組蛋白產(chǎn)品。
蛋白酵母分泌表達步驟與周期
步驟 | 服務內(nèi)容 | 周期 |
酵母表達載體亞克隆 | *密碼子優(yōu)化,基因合成(或客戶提供質(zhì)粒模板:目的基因擴增) *將目標基因亞克隆到合適的表達質(zhì)粒上,可提供表達載體,如pPICZaA 、pGAPZaA、pPIC9K *拼接序列驗證:測序 *交付:正確構建的重組表達質(zhì)粒,含重組質(zhì)粒的DH5α菌株及測序原始報告 | 1-2周 |
酵母表達菌株轉(zhuǎn)化 | *可提供表達菌株:X33,GS115,釀酒酵母等。 *擴增培養(yǎng)5-10個陽性克隆并進行重組蛋白誘導表達 *SDS-PAGE交付:陽性克隆菌株及表達篩選結果報告。 | 2周 |
酵母表達菌株篩選 | *檢測重組蛋白表達情況(適用于多拷貝數(shù)和高表達菌株) *交付:陽性克隆菌株及表達篩選結果報告。 | 2周 |
酵母表達菌株表達優(yōu)化 | 對挑選出來的單克隆菌株,優(yōu)化培養(yǎng)及誘導條件(培養(yǎng)基,菌體密度,甲醇濃度,誘導時間等),提高目標蛋白的表達量 | 2周 |
小規(guī)模蛋白表達及純化 | *1L發(fā)酵液通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。 *SDS-PAGE交付:重組蛋白0.02-3mg及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒═ag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度>85%。 | 2-3周 |
大規(guī)模蛋白表達及純化 | 10L,30L,80L,130L,500L發(fā)酵規(guī)模 |
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增值服務 | *通過HPLC,質(zhì)譜等方法詳細檢測目標蛋白的質(zhì)量。 *蛋白質(zhì)N端測序:PPSQ31(Edman降解法測序儀) | 1-2周
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服務優(yōu)勢
--密碼子優(yōu)化:包含稀有密碼子分析,蛋白親水性分析和跨膜結構域的預測分析
--分泌蛋白表達,接近天然構象的重組蛋白
--多種規(guī)模蛋白發(fā)酵模式:小規(guī)模(500ml、10L)和大規(guī)模(80L、130L、250L和500L發(fā)酵罐)
--高純度毫克級,克級重組蛋白;穩(wěn)定的批間一致性
--低內(nèi)毒素:LAL檢測法<0.1EU/ug
--完整的GMP文件支撐體系,保證實驗信息可追溯
更多技術服務:
病理相關檢測服務
組織石蠟包埋服務
特殊包埋(細胞團、眼球、斑馬魚等)服務
石蠟切片服務
冰凍切片服務
骨組織脫鈣(快脫)服務
骨組織脫鈣(慢脫)服務
HE染色服務
細胞爬片/細胞涂片/細胞滴片服務
石蠟切片免疫組化(IHC-P)服務
冰凍切片免疫組化(IHC-Fr)服務
細胞爬片免疫組化(IHC)服務
組織芯片免疫組化服務
原位雜交實驗(DAB顯色)服務
組織免疫熒光(IF)---單標服務
組織免疫熒光(IF)---雙標服務
細胞樣本免疫熒光(ICC)---單標服務
細胞樣本免疫熒光(ICC)---雙標服務
組織芯片免疫熒光(單標)服務
組織芯片免疫熒光(雙標)服務
TUNEL檢測(白光)服務
In Situ Cell Death Detection Kit, POD服務
TUNEL檢測 (熒光)服務
原位細胞死亡檢測試劑盒(綠色熒光素法)服務
普通白光拍照服務
偏振光拍照服務
免疫熒光單標拍照服務
免疫熒光雙標拍照服務
激光共聚焦開機費服務
激光共聚焦拍照服務
普通切片全景掃描(白光)服務
普通切片全景掃描(熒光)服務
組織芯片掃描(白光)服務
組織芯片掃描(熒光單標 )服務
外泌體透射電鏡服務
透射電鏡服務
掃描電鏡服務
Masson 染色服務
天狼猩紅染色服務
阿利新藍染色(AB染色)服務
PAS染色(過碘酸雪夫染色)服務
AB-PAS染色(阿利新藍-過碘酸-雪夫染色)服務
Von kossa染色服務
茜素紅染色服務
尼氏染色(焦油紫法或亞甲藍法)服務
甘氨酸銀染色/鍍銀染色--(神經(jīng))服務
LFB髓鞘染色/固藍染色服務
高爾基染色(神經(jīng)纖維染色)服務
剛果紅染色服務
油紅O染色服務
瑞氏染色服務
姬姆薩染色服務
瑞氏-吉姆薩復合染色服務
關鍵字: 重組蛋白酵母表達服務;蛋白酵母;酵母表達;酵母表達服務;蛋白酵母表達服務;
湖北艾普蒂生物工程有限公司(簡稱:艾普蒂)由在國內(nèi)科研試劑領域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗的專業(yè)技術團隊和企業(yè)管理團隊組建而成,專門從事以抗體、蛋白、細胞、化學品為核心的試劑產(chǎn)品研發(fā)與銷售。
我們長期聚焦于生命科學、生物醫(yī)藥、醫(yī)療診斷、分析檢測等領域,專注于為生命科學和生物技術領域的客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術服務。提供生命科學 試劑、供應鏈服務等,為更多的生命科學科研工作者提供 專業(yè)、全面、安全、快捷的產(chǎn)品和服務。產(chǎn)品覆蓋 基因、蛋白、細胞、組織、動物等水平的各種研究。
致力于成長為我國重要的生命科學試劑和成果轉(zhuǎn)化一體化的領導者、致力于成為中國大型的科研試劑產(chǎn)品供應商之一。