碧云天生產(chǎn)的BL21(AI)超級感受態(tài)細(xì)胞,英文名BL21(AI) Super Competent Cells,是一種可以用于表達(dá)對細(xì)菌有毒性或抑制生長的重組蛋白的E. coli BL21(AI)即用型化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞。使用pUC19質(zhì)粒進(jìn)行熱激活轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)化效率可以高達(dá)1×108cfu/μg DNA以上。
BL21(AI)來源于BL21菌株,可用于基于T7聚合酶的重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)。二者的主要區(qū)別是T7 RNA聚合酶在BL21具有一定基礎(chǔ)表達(dá)水平,而在BL21(AI)中這一基礎(chǔ)表達(dá)可降低到極低水平。因此BL21(AI)更適合于對細(xì)菌有毒性的重組蛋白表達(dá)。
BL21(AI)中araBAD啟動(dòng)子下游T7 RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄受到L-阿拉伯糖嚴(yán)格控制,培養(yǎng)基中添加葡萄糖可抑制araBAD啟動(dòng)子活性,添加L-阿拉伯糖則驅(qū)動(dòng)T7 RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄進(jìn)而誘導(dǎo)表達(dá)重組蛋白。
BL21(AI)為lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株,這兩種酶的缺失有效防止異源蛋白在大腸桿菌體內(nèi)的降解。BL21(AI)感受態(tài)細(xì)胞適用于任何以T7啟動(dòng)子為基礎(chǔ)的表達(dá)載體,能夠進(jìn)行高水平的重組蛋白表達(dá)[1]。普通重組蛋白在BL21(AI)菌株中獲得的產(chǎn)量和其他BL21菌株產(chǎn)量相當(dāng);而對大部分毒性蛋白,在BL21(AI)菌株中獲得的產(chǎn)量高于BL21 (DE3)PLysS菌株或BL21(DE3)菌株。
BL21(AI)菌株的基因型為F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm araB::T7RNAP-tetA。
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