參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：長(zhǎng)須白蛉PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P686
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞亞甲藍(lán)（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Methylthioninium Chloride Trihydrate

mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 小鼠精母細(xì)胞，GC-2spd細(xì)胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮細(xì)胞)華法林鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法含量測(cè)定用Warfarin

類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7華法林鈉質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRWarfarin

CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 洛莫司?。?biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測(cè)定Lomustine

小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA度洛西汀質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Duloxetine

長(zhǎng)須白蛉PCR檢測(cè)試劑盒二萘嵌苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Perylene  Humanmannosereceptor，MRELISAKit人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  植物蔗糖1酸合成酶(SPS)試劑盒 Pla Sucrose Phosphate Syhase,SPS ELISA Kit

苝(升華提)(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)Perylene (purified by sublimation)  人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  CLIAKitforPL-A2(MousePhospholipidaseA2)ELISAKit小鼠1脂酶A2規(guī)格：48T/96T

1,1,4,4-四苯基-1,3-丁二烯(>99.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)1,1,4,4-Tetraphenyl-1,3-butadiene  Rat lipoprotein lipase (LPL) ELISA Kit 大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒  石蠟切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位直接染色試劑盒50

8-羥基米氮平β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口8-Hydroxy Mirtazapine β-D-Glucuronide  HumanhepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAgELISAKit 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  ELISAKitLDL-IC人低密度脂蛋白復(fù)合物規(guī)格：48T/96T

牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白組分五Albumin(bovine fraction V);BSA質(zhì)量規(guī)格：Purity>98%,分子生物學(xué)級(jí)  蛋白質(zhì)西方雜交10倍印跡膜轉(zhuǎn)移緩沖液500毫升  鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測(cè)試劑盒 48T

萘啶酮酸；萘啶酸Nalidixic 質(zhì)量規(guī)格：>98%  RatNervegrowthfactor,NGFELISA試劑盒大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humanstaphylocusaureuseerotoxins,SEELISA試劑盒人金葡菌腸(SE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元Glycogen from oyster質(zhì)量規(guī)格：BR,>99%,河蚌提取,Type II  小鼠纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)ELISA試劑盒 ，英文名： FGL1 ELISA Kit  ELISAKitAQP-2小鼠水通道蛋白2規(guī)格：48T/96T

普拉格雷Prasugrel質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR  兔子生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T  Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T