1.細胞起源：

細胞簡稱 DLD-1

細胞別稱 DLD 1; DLD1; CoCL3

細胞背景描述 DLD-1細胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分離的兩株結直腸腺癌細胞株中的一株。在ATCC和其它地方進行的DNA指紋鑒定和染色體組型分析表明DLD-1細胞與HCT-15細胞相似，說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。DLD-1細胞和HCT-15細胞的遺傳起源可通過DNA指紋鑒定證實，但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標記一致改變或數(shù)目上一致改變。DLD-1細胞的CSAp陰性(CSAp-)，p53抗原表達呈陽性(p53抗原產(chǎn)生了一個C→T點突變導致241位的Ser→Phe)。DLD-1細胞角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性，癌基因N-myc的表達未做檢測。DLD-1細胞表達腫瘤特異性核基質蛋白CC-2、CC-3、CC-4、CC-5和CC-6。1979年提交到ATCC的DLD-1細胞代數(shù)不明且污染了支原體，其后經(jīng)過12周多種抗生素聯(lián)合培養(yǎng)處理，處理之后每周用Hoechst染色和標準培養(yǎng)法檢測。其后連續(xù)11個月不加抗生素培養(yǎng)，DLD-1細胞所有的檢測呈陰性。

供體年齡 成年

組織來源 結直腸腺癌上皮細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

細胞類型 腫瘤細胞

腫瘤類型 腸癌細胞

生長特性 貼壁細胞

生物安全等級 1

2.培養(yǎng)及保藏：

完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)

培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO ₂，5%

37℃

凍存條件 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

液氮

3.傳代方法：

傳代步驟 

1、吸出原培養(yǎng)液；

2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄；

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞；

4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；

5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液；

6、收集細胞懸液離心，1200rpm/min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄；

7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。

消化時間 2~3分鐘

傳代比例（密度） 1:3-1:4

換液頻次 2~3次/周

倍增時間 ~24-48 hours