1.細胞起源:
細胞簡稱 CT26.WT
細胞別稱 CT26WT
細胞背景描述 CT26細胞是以N-亞硝基-N-甲基氨基甲酸酯(NNMU)誘導形成的未分化結(jié)腸癌細胞株,它克隆形成的細胞株命名為CT26.WT。用包含編碼典型腫瘤相關(guān)抗原(TAA)β-半乳糖苷酶(β-gal)的lacZ基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CT26.WT細胞,得到致死的亞克隆CT26.CL25。即使CT26.CL25細胞表達了典型的TAA-β-半乳糖苷酶,在正常小鼠中CT26.CL25細胞和CT26.WT細胞的生長率與致死率也保持基本一致。CT26.WT細胞與CT26.CL25細胞一起可用作測試免疫治療程序的模型,并用于研究宿主免疫反應。
供體年齡 不詳
組織來源 器官:結(jié)腸;品系:BALB/c;疾?。喊?/p>
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 腸癌細胞
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周