適用于檢測(cè)組織、血清等樣品中的鐵含量。
在酸性介質(zhì)中鐵從復(fù)合物中解離出來,再被還原劑還原成二價(jià)鐵,并與亞鐵嗪生成紫紅色化合物,
該有色物質(zhì)在 562nm 處有特征吸收峰,進(jìn)而計(jì)算得出鐵含量。
1、 樣本制備:
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液,進(jìn)行冰浴勻漿。4℃×12000rpm 離心 5min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取。
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(104):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。
③ 液體樣本:澄清的液體可直接檢測(cè);若渾濁則離心后取上清液檢測(cè)。
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