貨號:HH0901-01,HH0901-02,HH0901-03,HH0901-04;
技術(shù)指標(biāo)
外觀:白色微黃無定型凍干粉末;蛋白純度:≥90%;比活性:≥4U/mg酶粉;過氧化氫酶:≤0.03%;NADH/NADPHoxidase:≤0.01%
酶學(xué)性質(zhì)
來源:微生物;分類:EC1.7.3.3;分子量:40kDa(SDS-PAGE);等電點:5.1;Km值:2.1×10-5M(Urate);抑制劑:Fe3+,Co2+,Cu2+,Mn2+,Zn2+;最適:pH8.5;最適溫度:37℃;pH穩(wěn)定性5.5-10.0(25℃,16h);熱穩(wěn)定性60℃以下穩(wěn)定(pH8.5,30min);穩(wěn)定性:-20℃靜置保存12個月保持80%以上活性;保護(hù)劑:硼酸鹽、EDTA及非離子型表面活性劑。
用途:用于尿酸試劑的研發(fā)和大量配制。
酶活定義:單位酶活定義為在下述反應(yīng)條件下,每分鐘氧化1μmol尿酸所需的酶量。
試劑準(zhǔn)備:酶稀釋液:在800mL雙蒸水中溶解3.09g硼酸,0.37g,EDTA·Na2·2H2O和0.01gTritonX-100,用NaOH調(diào)節(jié)pH至8.5,用雙蒸水定容至1000mL。
試劑I:0.01%尿酸母液(稱取0.01g尿酸,用酶稀釋液定容至100mL)。
試劑II:0.001%尿酸溶液(取10mL試劑I,用酶稀釋液定容至100mL)。
樣品:用酶稀釋液將酶稀釋至0.05-0.10U/mL。
操作步驟
1.將試劑II置于37℃水浴鍋預(yù)熱。
2.向3mL比色皿中加入2mL試劑II,0.5mL雙蒸水。加入0.5mL待測酶液,混勻。
3.37℃反應(yīng),用分光光度計在290nm檢測樣品1min內(nèi)的吸光度變化(ΔAs)。
關(guān)鍵字: 尿酸酶(UA-T);尿酸酶;尿酸酶(UA-T);Uricase;
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