產(chǎn)品信息

產(chǎn)品簡介

超快轉(zhuǎn)膜液使用獨(dú)特配方，能高效超快地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜（PVDF或硝纖膜）上。濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）或半干轉(zhuǎn)法（Semi-dry blot）都可以使用。 
產(chǎn)品特點(diǎn)：

超快和環(huán)保：能在15-35分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)膜過程。超快轉(zhuǎn)膜液不使用甲醇，減輕了對實(shí)驗(yàn)者和環(huán)境的傷害。
兼容性好：超快轉(zhuǎn)膜液能兼容Laemmli膠，預(yù)制膠，Bis-Tris膠等多種凝膠。
轉(zhuǎn)移效率高：超快轉(zhuǎn)膜液對分子量跨度較大的蛋白也有保存與運(yùn)輸方法

使用說明

轉(zhuǎn)膜前準(zhǔn)備：5-6張裁好的濾紙：裁好的轉(zhuǎn)印膜；足夠的1×超快轉(zhuǎn)移buffer。

一、濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）

1、配制1×超快轉(zhuǎn)膜液

1升1×Western超快轉(zhuǎn)膜液：取50ml 20×超快轉(zhuǎn)膜液，膠乳750ml雙蒸水，混勻后膠乳200ml甲醇，混勻即可，現(xiàn)配現(xiàn)用，配好后置于冰上存放）。

2、將濾紙和海綿浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中，完全浸濕。

3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中（注意：在使用6%或8%分離膠轉(zhuǎn)移大分子蛋白時(shí)，應(yīng)該降低甲醇含量至10%，以獲得更好轉(zhuǎn)移效果）。

按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)。

一、半干轉(zhuǎn)（Semi-dry blot）

  1、按照下表配制1×超快轉(zhuǎn)膜液

2、將濾紙浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中，完全浸濕。

3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快

轉(zhuǎn)膜液中。

注意：水中漂洗時(shí)間一定不能超過2分鐘，否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。

4、按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)。

半干轉(zhuǎn)時(shí)，濾紙、膠、膜之間的大小，一般是下層濾紙≥膜大于等于膠≥上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸；濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會造成短路。

注意：PVDF膜使用前需用無水甲醇潤濕30秒。

三、轉(zhuǎn)移條件

1、濕轉(zhuǎn)

 推薦使用恒流轉(zhuǎn)移，電流可設(shè)置350-400mA，轉(zhuǎn)膜液中離子成分較多，可以承受大電流，并且發(fā)熱量較低。

注：不推薦使用恒壓轉(zhuǎn)移，因轉(zhuǎn)膜液中離子成分較多，當(dāng)電壓在100v左右時(shí)，電流會達(dá)到400mA，此時(shí)已達(dá)到普通電泳儀器zui大電流，隨著時(shí)間延長，可能無法達(dá)到穩(wěn)定的100v電壓。

2、半干轉(zhuǎn)

保存：常溫保存。

注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。