產(chǎn)品簡介
Annealing Buffer for RNA Oligos (5×),即 RNA 寡核苷酸退火緩沖液,可以用于 RNA Oligos
的退火,可以有效避免 RNAOligos 自身形成發(fā)夾結(jié)構(gòu), 有利于退火的正確進(jìn)行。 該退火緩沖液不含 RNase,可避免RNA 的降解。
保存條件
常溫配送。一個(gè)月內(nèi),4oC保存。-20oC長期保存,至少1年有效。
注意事項(xiàng)
1. RNA 易降解,需嚴(yán)格遵守 RNA 操作規(guī)范,防止 RNase 污染。
2. 本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究,不得用于臨床診斷和治療,不得用于食品和藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
3. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明
1.將 RNA Oligos 用 DEPC 水配制成 200 μM,融化 RNA 退火緩沖液(5×) ,混勻備用。
2. 配置如下退火反應(yīng)體系,混勻。
DEPC Water 30 μL
NA 退火緩沖液(5×) 20 μL
NA Oligo A (200 μM) 25 μL
NA Oligo B (200 μM) 25 μL
總體積 100 μL
3. 退火方法一:
將退火反應(yīng)體系置于 PCR 儀中, 設(shè)置反應(yīng)條件: 90℃變性 1 min, -1℃/60s/cycle 緩慢降溫至 25℃。 程序設(shè)置以
Bio-Rad 的 T100 為例為: 1. 90℃, 1:00; 2. 90℃, 1:00, -1℃ per cycle; 3. GOTO
step 2,65X; 4. 4℃, ∞。
4. 退火方法二: 將退火反應(yīng)體系放于 90°C 水浴鍋或金屬浴, 持續(xù) 1 min,后將退火反應(yīng)體系置于一杯含有90°C 水的保溫杯中,讓其開蓋自然冷卻至室溫。
Note: 緩慢降溫對(duì)形成正確的結(jié)構(gòu)是非常有幫助的,降溫過快將導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生。
5. 退火結(jié)束后可以直接用于轉(zhuǎn)染細(xì)胞,也可以-80oC 凍存?zhèn)溆谩?/span>
關(guān)鍵字: RNA退火緩沖液;
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