一、 試劑盒簡介
本試劑盒可從動(dòng)物細(xì)胞或組織中快速提取總RNA。試劑盒基于硅膠柱純化技術(shù)，提取過程中無需使用有毒的酚/ 氯仿抽提，全程僅需15 min。試劑盒中DNA Removing Spin Columns能夠有效去除裂解產(chǎn)物中的基因組DNA，另外，試劑盒中配有gDNA Remover膜上消化模塊，可有效去除基因組DNA 污染；RNA Spin Columns能高效的結(jié)合RNA，配以優(yōu)化后的Buffer溶液，使得到的總RNA純度高，無蛋白和其他雜質(zhì)污染，可用于RT-PCR、Real-time PCR、芯片分析等多種下游實(shí)驗(yàn)。
二、產(chǎn)品組分
Components | B0004D (100 Preps) |
Lysis Buffer | 60 ml |
Wash Buffer*1 | 12 ml |
Elution Buffer | 5 ml |
gDNA Remover | 220 μl |
DNA Removing Spin Columns (with Collection Tubes) | 50 Preps |
Spin Columns(with collection Tubes) | 50 Preps |
*1：Wash Buffer使用前須加入24毫升的無水乙醇，混勻后方可使用。
三、試劑保存條件
本試劑盒中的Lysis Buffer、Wash Buffer、Elution Buffer、DNA Removing Spin Columns
和Spin Columns建議保存在室溫條件，gDNA Remover建議保存在-20℃冰箱中。
四、試劑盒特點(diǎn)
1、純度高：細(xì)胞裂解產(chǎn)物先經(jīng)過DNA吸附柱吸附去除基因組DNA，然后過RNA吸附柱，又使用gDNA Remover處理，這2步高效去除了混有在RNA的基因組DNA；
2、簡單快速：步驟簡單，10分鐘即可得到高純度的RNA；
3、適用性廣：使用本試劑盒提取的RNA可用于RT-qPCR、Northern Blotting、cDNA文庫構(gòu)建、RNA測序等各種實(shí)驗(yàn)；
4、所需樣品少（得率高）：可以提取低至2萬細(xì)胞或1 mg組織的RNA；
5、健康安全：不使用揮發(fā)性的酚、氯仿等有毒/致癌物質(zhì)，無須DEPC滅菌，更有益于身體健康。
五、注意事項(xiàng)
1、Wash Buffer使用前須加入24毫升的無水乙醇，混勻后方可使用。
2、建議使用前把Elution Buffer分裝成3份，以減少污染的概率。
3、RNA提取需在室溫進(jìn)行，提取過程中不可置于冰上。
4、建議用6孔板或者35 mm培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)胞，培養(yǎng)至合適的細(xì)胞密度進(jìn)行RNA提取（建議培養(yǎng)至80%以上的細(xì)胞密度），不建議用100 mm培養(yǎng)皿培養(yǎng)的細(xì)胞直接裂解提取RNA，否則可能導(dǎo)致細(xì)胞裂解不充分或離心柱堵塞或?qū)е禄蚪M殘留。
5、在RNA提取過程的最后一步將RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫下來時(shí)，一定要將洗脫液加到膜上，而不是側(cè)壁上，否則達(dá)不到溶解RNA的目的。
關(guān)鍵字： RNA提取，超純，試劑盒，細(xì)胞;