淀粉分支酶（Starch branching enzyme，SBE）試劑盒說明書
分光光光度法 50管/24樣
注 意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶，測定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。
測定原理：
直鏈淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收，SBE使直鏈淀粉含量減少，從而降低了淀粉-碘復合物在660nm吸收值，一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自備的的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水
淀粉分支酶（Starch branching enzyme，SBE）試劑盒試劑的組成和配制：
提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×2支，4℃保存；臨用前每支加入1mL蒸餾水，95℃沸水浴充分溶解后備用；用不完的試劑4℃保存；
試劑三：液體25mL×1瓶，4℃保存；
試劑四：液體5mL×1瓶，4℃保存；
粗酶液提取：
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
淀粉分支酶（Starch branching enzyme，SBE）試劑盒測定步驟：
試劑名稱（μL） | 對照管 | 測定管 |
95℃水浴1min后滅活的粗酶液 | 250 |
|
粗酶液 |
| 250 |
試劑一 | 320 | 320 |
試劑二 | 30 | 30 |
混勻，37℃準確保溫20 min，95℃水浴5min（蓋緊防止水分散失），冷卻
混勻，室溫靜置10min，用蒸餾水調(diào)零，660nm處讀取各管吸光值。
注意：
1、可以在不同對照管中加入不同樣品的粗酶液，然后集中進行5min 95℃水浴處理。
2、試劑二如有沉淀，務必沸水浴溶解后使用。
SBE活力單位的計算
1、按照蛋白濃度計算
單位的定義：以波長660nm的吸光度下降百分率表示，每mg蛋白在反應體系中每降低1％碘藍值為一個酶活性單位。
SBE活性(U/mg prot)=( A對照管-A測定管)/A對照管÷Cpr ×100
2、按照樣本鮮重計算
單位的定義：以波長660nm的吸光度下降百分率表示，每g組織在反應體系中每降低1％碘藍值為一個酶活性單位。
SBE活性(U/g 鮮重)=(A對照管-A測定管)/A對照管÷(W÷V樣總)×100
V樣總：提取液總體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g。
關(guān)鍵字： 淀粉分支酶（Starch branchi;淀粉分支酶（Starch branchi;
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