無蛋白非程序性細胞凍存液
一、產(chǎn)品簡介。
本產(chǎn)品是一種不含胎牛血清和其它動物源性蛋白成份的細胞凍存試劑，由細胞膜保護劑、滲透性和非滲透性保護劑組成，并添加細胞營養(yǎng)物質(zhì)，凍存細胞的同時提高細胞的存活率。
二、運輸與存儲條件。
本產(chǎn)品低溫運輸，-20 ℃保存，有效期 12 個月。使用過程中，4 ℃保存，1 個月內(nèi)用完，避免反復凍融。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 與市面其它類似產(chǎn)品相比，本產(chǎn)品純由化學物質(zhì)配制而成，不含任何動物源性成份，可用于常規(guī)培養(yǎng)細胞和臨床治療用細胞的凍存。
2. 本產(chǎn)品凍存細胞時不需要程序性降溫盒，重懸細胞后可直接置于-80 ℃冰箱中保存，12 h 后轉到液氮中保存，或一直存放于-80 ℃冰箱中保存（6 個月）。
3. 本產(chǎn)品凍存細胞效果好，細胞復蘇率高，與含有胎牛血清（FBS）的凍存液效果一致。
4. 本產(chǎn)品中的 DMSO 含量為 5%，對凍存細胞的毒性較小。
四、使用說明。
1. 細胞凍存。
1) 細胞培養(yǎng)。細胞接種于直徑為 100 mm 的培養(yǎng)皿中，24 或 48 h 后密度達到 80%左右，處于對數(shù)生長期。
2) 細胞收集。胰酶消化法收集貼壁細胞（或直接收集懸浮細胞），1 000 rpm，離心 5 min，棄上清。
3) 細胞凍存。加入 2 ml 無蛋白非程序性細胞凍存液，混勻，分裝于 2 支凍存管，置于-80 ℃冰箱中，12 h 后轉入液氮長期保存。
2. 細胞復蘇。
1) 預熱。提前開啟水浴鍋，溫度調(diào)整到 37 ℃（或 42 ℃，能夠促進細胞凍存液更快的融化）。
2) 細胞復蘇。從液氮罐或-80 ℃冰箱中取出凍存細胞，立即置于預熱后的水浴鍋中，快速晃動凍存管，使凍存細胞盡快融化。
3) 離心。將融化的凍存細胞轉入含有9 ml細胞培養(yǎng)液的離心管中，混勻，1 000 rpm，離心5 min，棄上清。（融化的凍存細胞也可直接離心）
4) 細胞培養(yǎng)。在離心管中加入 1 ml 的細胞培養(yǎng)液，混勻，轉入含有 9 ml 細胞培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)皿中，混勻，置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
5) 檢測。24 h 后觀察細胞貼壁情況和生長狀態(tài)。
五、注意事項。
1. 為了保證細胞凍存效果，細胞凍存時應該生長良好，盡量處于對數(shù)生長期。
2. 凍存細胞的密度一般控制在 1-5 ×106 cells / mL 左右，密度過低或過高都會影響凍存效果。
3. 細胞復蘇后離心除去細胞凍存液，避免細胞凍存液對細胞生長的影響。
4. 本產(chǎn)品凍存的細胞可以在-80 ℃冰箱中保存 6 個月，長期保存時請轉入液氮罐。
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