"5-8F:鼻咽癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HAEC細胞類似產(chǎn)品：：Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞

Pa17C細胞類似產(chǎn)品：：H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞

Jijoye細胞類似產(chǎn)品：：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞

PNT1A細胞類似產(chǎn)品：：RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

SKml2細胞類似產(chǎn)品：：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞

NCI-H345細胞類似產(chǎn)品：：MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞

TE-7細胞類似產(chǎn)品：：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長　

傳代24h-48h處于對數(shù)期的細胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細胞沉淀；用血清重懸細胞沉淀，用血球計數(shù)板或者細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù)；配制細胞凍存液，將凍存液加到細胞液中，吹打混勻，控制細胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細胞懸液按照1ml/支分裝至已標記HAO的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過夜后將凍存細胞移至液氮中長期保存。凍存管內(nèi)細胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細胞凍存和復(fù)蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。細胞凍存時細胞狀態(tài)不佳，會嚴重影響復(fù)蘇時細胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存，凍存前一天細胞ZuiHAO進行換液；消化過度也會嚴重影響細胞凍存后復(fù)蘇的活率；凍存細胞時為按照溫度梯度進行操作，會嚴重影響細胞活率。

VMRC-LCD細胞類似產(chǎn)品：：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞

LAN-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞

SK-N-BE2C細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞

A549/DDP細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞

U-251MG細胞類似產(chǎn)品：：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞類似產(chǎn)品：：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞

COLO320DM細胞類似產(chǎn)品：：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞

SW 756細胞類似產(chǎn)品：：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞

IM 9細胞類似產(chǎn)品：：3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞

BGC823細胞類似產(chǎn)品：：KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞

U-937細胞類似產(chǎn)品：：MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞

V 79-4細胞類似產(chǎn)品：：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞

HFLS-RA細胞類似產(chǎn)品：：Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞

16HBE細胞類似產(chǎn)品：：MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞

R-1059-D細胞類似產(chǎn)品：：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞

HB 611細胞類似產(chǎn)品：：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞

HB 611細胞類似產(chǎn)品：：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞

118MG細胞類似產(chǎn)品：：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞

D-341Med細胞類似產(chǎn)品：：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞

H.Ep. No. 2細胞類似產(chǎn)品：：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞

MDA1386細胞類似產(chǎn)品：：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞

UPCI-SCC-154細胞類似產(chǎn)品：：C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞

COR-L51細胞類似產(chǎn)品：：C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞

NK92細胞類似產(chǎn)品：：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞

5-8F:鼻咽癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Glioma-261細胞類似產(chǎn)品：：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞

MESSA/Dx5細胞類似產(chǎn)品：：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞

OV-CA 432細胞類似產(chǎn)品：：KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞

HANK細胞類似產(chǎn)品：：BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞

SNU182細胞類似產(chǎn)品：：U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞

H1155細胞類似產(chǎn)品：：HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞

WM115F細胞類似產(chǎn)品：：WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞

HPASMC細胞類似產(chǎn)品：：SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞

NCI-157細胞類似產(chǎn)品：：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞

V79-GalK1細胞類似產(chǎn)品：：GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞

P3X63Ag8-6-5-3細胞類似產(chǎn)品：：SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞

HEK293-H細胞類似產(chǎn)品：：SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞

HUT 28細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞

PSN-1細胞類似產(chǎn)品：：BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞

NCI-H1404細胞類似產(chǎn)品：：THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞

TE 85.T細胞類似產(chǎn)品：：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞

NCI.H226細胞類似產(chǎn)品：：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞

LNCaP FGC細胞類似產(chǎn)品：：H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞

U-343 MG細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞

hTERT-HME1細胞類似產(chǎn)品：：A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞

BTI-Tn-5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞

HO-8910細胞類似產(chǎn)品：：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞

P3J HR-1細胞類似產(chǎn)品：：GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞

MADISON LUNG TA-109細胞類似產(chǎn)品：：PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞

Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞類似產(chǎn)品：：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞

H-1648細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-3細胞、MLMEC細胞、CPA47細胞

CMT 93細胞類似產(chǎn)品：：FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞

L-6細胞類似產(chǎn)品：：L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞

QBI-293A細胞類似產(chǎn)品：：G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞

TE32細胞類似產(chǎn)品：：NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞

LL2細胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞

MDA-MB-435S細胞類似產(chǎn)品：：Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞

A375細胞類似產(chǎn)品：：LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞

Caco 2細胞類似產(chǎn)品：：HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞

NPA 87細胞類似產(chǎn)品：：L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞

EBTr細胞類似產(chǎn)品：：RWPE2細胞、U-251MG細胞、RBL.2H3細胞

SF-539 BT細胞類似產(chǎn)品：：SCL1細胞、IMCD3細胞、HEI-193細胞

SK-N-BE2C細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB468細胞、HL60細胞、HCC-1187細胞

ZR751細胞類似產(chǎn)品：：PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞

TFK-1細胞類似產(chǎn)品：：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞

Helacyton gartleri細胞類似產(chǎn)品：：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞

MILE SVEN 1細胞類似產(chǎn)品：：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞

B-cell with DC Morphology細胞類似產(chǎn)品：：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞

A549/DDP細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞

COS-7細胞類似產(chǎn)品：：U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞

H-146細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞

CDC/EU.HMEC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞

J774.A1細胞類似產(chǎn)品：：DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞

CAL62細胞類似產(chǎn)品：：H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞

NCIADR.RES細胞類似產(chǎn)品：：SUNE 1細胞、SU-DHL-5細胞、3LL細胞

SC細胞類似產(chǎn)品：：DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞

CEM/C1細胞類似產(chǎn)品：：H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞

NCI-H23細胞類似產(chǎn)品：：HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞

HLE B-3細胞類似產(chǎn)品：：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Ly1細胞、CZ-1細胞

RIN-14B細胞類似產(chǎn)品：：Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞

HT-1080細胞類似產(chǎn)品：：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞

MH-S細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞

U251-MG細胞類似產(chǎn)品：：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞

U251-MG細胞類似產(chǎn)品：：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞

BNL-CL.2細胞類似產(chǎn)品：：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞

RPMI 2650細胞類似產(chǎn)品：：JIMT細胞、HuLEC-5a細胞、H-735細胞

VP 267細胞類似產(chǎn)品：：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞

CHAGOK1細胞類似產(chǎn)品：：Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞

J774 A.1細胞類似產(chǎn)品：：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞

NCI-H1993細胞類似產(chǎn)品：：PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞

Malme-3M細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞

AML-2細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly7細胞、NCI-H1755細胞、C-28I2細胞

COLO 320DM細胞類似產(chǎn)品：：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞

J45.01細胞類似產(chǎn)品：：H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞

LX-2細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞

MV4;11細胞類似產(chǎn)品：：Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、LICR-HN6細胞、PA1細胞

Ramos.G6.C10細胞類似產(chǎn)品：：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞

S180細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞

T-47-D細胞類似產(chǎn)品：：BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞

Hs888T細胞類似產(chǎn)品：：C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞

Sp 2/0-Ag 14細胞類似產(chǎn)品：：SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞

MFE 280細胞類似產(chǎn)品：：C57 Mouse Tumor 64細胞、SK ES 01細胞、HCC-1833細胞

A-375SM細胞類似產(chǎn)品：：HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞

Me Wo細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞

Mv1.Lu細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞

C-28/I2細胞類似產(chǎn)品：：C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞

B-cell with DC Morphology細胞類似產(chǎn)品：：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞

5-8F:鼻咽癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

JG細胞類似產(chǎn)品：：SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞

NCIH520細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞

T/GHA-VSMC細胞類似產(chǎn)品：：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞

PC 61 5.3細胞類似產(chǎn)品：：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞

HG2855細胞類似產(chǎn)品：：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞

HCT-GEO細胞類似產(chǎn)品：：SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞

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