"NCM460:結(jié)直腸腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

H-2087細胞類似產(chǎn)品：：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞

IPLB-SF-21-AE細胞類似產(chǎn)品：：SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞

NTHY-ORI3.1細胞類似產(chǎn)品：：hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞

AK細胞類似產(chǎn)品：：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、HGMC細胞、TE-13細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

SUM 52PE細胞類似產(chǎn)品：：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞

NCI-H2444細胞類似產(chǎn)品：：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞

RAMSCs細胞類似產(chǎn)品：：H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞

購買細胞注意事項：１)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完HAO，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系；２)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等；３)用７５%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次；４)建議客戶收到細胞后前３天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流?！炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代：１)提前將培養(yǎng)基、PBS放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用７５%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)；２)吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞；３)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，３７℃孵育，每隔２~３min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用；４)用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡；５)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代：１)將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，１０００rpm離心５min；２)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液；３)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞類似產(chǎn)品：：HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞

SNU638細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞

MKN 28細胞類似產(chǎn)品：：AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞

Jiyoye(P-2003)細胞類似產(chǎn)品：：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞

SK-MEL3細胞類似產(chǎn)品：：D283MED細胞、MDA-MB231細胞、PaTu 8988s細胞

NCIH1975細胞類似產(chǎn)品：：SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞

VERO C 1008細胞類似產(chǎn)品：：IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞

HCC0366細胞類似產(chǎn)品：：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞

P3/X63/Ag8細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞

MDCK (NBL-2)細胞類似產(chǎn)品：：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞

ST486細胞類似產(chǎn)品：：GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞

KRC/Y細胞類似產(chǎn)品：：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞

P3/NS1/1-Ag4-1細胞類似產(chǎn)品：：EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞

WM115mel細胞類似產(chǎn)品：：Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞

ROS17/28細胞類似產(chǎn)品：：Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞

MDCK細胞類似產(chǎn)品：：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞

SNU-16細胞類似產(chǎn)品：：2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞

SW 982細胞類似產(chǎn)品：：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞

SK-ChA-1細胞類似產(chǎn)品：：CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞

AMO-1細胞類似產(chǎn)品：：Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞

CAL 148細胞類似產(chǎn)品：：TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞

SW1783細胞類似產(chǎn)品：：HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞

HM細胞類似產(chǎn)品：：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞

H23細胞類似產(chǎn)品：：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞

NCM460:結(jié)直腸腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

BALB 3T3 clone A31細胞類似產(chǎn)品：：MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞

Centre Antoine Lacassagne-33細胞類似產(chǎn)品：：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞

CL40細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞

MOLP2細胞類似產(chǎn)品：：MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞

Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞類似產(chǎn)品：：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞

AR4-2J細胞類似產(chǎn)品：：Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞

PC 61 5.3細胞類似產(chǎn)品：：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞

JG細胞類似產(chǎn)品：：SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞

P3X63NS1細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞

ASH3細胞類似產(chǎn)品：：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞

UWB1-289細胞類似產(chǎn)品：：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞

Vero-76細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞

Okayama University Medical School-23細胞類似產(chǎn)品：：OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞

COLO 205細胞類似產(chǎn)品：：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞

CHO-Lec1細胞類似產(chǎn)品：：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞

Line 870 Emory University-4細胞類似產(chǎn)品：：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞

COLO-205細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞

IPEC-1細胞類似產(chǎn)品：：P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞

MRC9細胞類似產(chǎn)品：：HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞

SNU216細胞類似產(chǎn)品：：MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞

C 643細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞

MARC-145細胞類似產(chǎn)品：：MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞

OKa-C-1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞

HuTu 80細胞類似產(chǎn)品：：BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞

SupB15WT細胞類似產(chǎn)品：：H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞

OVCAR 433細胞類似產(chǎn)品：：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞

MC/CAR細胞類似產(chǎn)品：：A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞

KP-2細胞類似產(chǎn)品：：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞

CAMA1細胞類似產(chǎn)品：：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞

HuT78細胞類似產(chǎn)品：：P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞

P3J細胞類似產(chǎn)品：：SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞

M-1細胞類似產(chǎn)品：：HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞

451Lu細胞類似產(chǎn)品：：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞

VMRC-RCZ細胞類似產(chǎn)品：：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞

PLA-801D細胞類似產(chǎn)品：：THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞

RWPE-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2073細胞、H-524細胞、EFM-192C細胞

HFB細胞類似產(chǎn)品：：SNU484細胞、UPCI-SCC-090細胞、U14細胞

MKN 28細胞類似產(chǎn)品：：AG06814-N細胞、PC615.3細胞、CHO-S細胞

3T3-442A細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞

U-87-MG細胞類似產(chǎn)品：：MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞

SKGT2細胞類似產(chǎn)品：：Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞

Caco2BBe細胞類似產(chǎn)品：：Tn-5B1-4細胞、OVCAR4細胞、LS174T細胞

MT-4細胞類似產(chǎn)品：：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞

MeWo細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞

A2780CP細胞類似產(chǎn)品：：SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞

SKUT1細胞類似產(chǎn)品：：Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞

SACCLM細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞

Human Hepatocyte Line 5細胞類似產(chǎn)品：：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞

OVCAR-8/ADR細胞類似產(chǎn)品：：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞

TFK-1細胞類似產(chǎn)品：：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞

GMK,BSC-1細胞類似產(chǎn)品：：TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞

GT38細胞類似產(chǎn)品：：TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞

H-1522細胞類似產(chǎn)品：：KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞

SUD-4細胞類似產(chǎn)品：：CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞

751細胞類似產(chǎn)品：：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞

IM95細胞類似產(chǎn)品：：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞

Clone M-3細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞

CCD 966SK細胞類似產(chǎn)品：：MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞

MASMC細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞

NCI-H774細胞類似產(chǎn)品：：UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞

MES-23.5細胞類似產(chǎn)品：：P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞

HuH1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞

MeSoTheliOma-211H細胞類似產(chǎn)品：：BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞

Human Kidney-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞

Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞類似產(chǎn)品：：SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞

SUDHL-16細胞類似產(chǎn)品：：F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞

ID8/MOSEC細胞類似產(chǎn)品：：QGP1細胞、NCIN87細胞、ADR-RES細胞

IOSE29細胞類似產(chǎn)品：：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞

HPDE細胞類似產(chǎn)品：：PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞

HFSF細胞類似產(chǎn)品：：526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞

HCMEC(BL12-H)細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞

CCD-841-CoTr細胞類似產(chǎn)品：：MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞

NCI-H716細胞類似產(chǎn)品：：GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞

M-1細胞類似產(chǎn)品：：HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞

NCI-H446細胞類似產(chǎn)品：：WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞

D-283細胞類似產(chǎn)品：：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞

BEL/FU細胞類似產(chǎn)品：：KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞

HEC1A細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞

J774A1細胞類似產(chǎn)品：：H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞

NCI-522細胞類似產(chǎn)品：：SR細胞、He La細胞、TE14細胞

WISH細胞類似產(chǎn)品：：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞

X63-Ag8-653細胞類似產(chǎn)品：：CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞

NCM460:結(jié)直腸腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

MonoMac 6細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞

KBM7細胞類似產(chǎn)品：：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞

He-La細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞

UK Pan-1細胞類似產(chǎn)品：：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞

SK-LMS-1細胞類似產(chǎn)品：：HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞

RPMI-1846細胞類似產(chǎn)品：：Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞

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